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一、儀器總覽

ABI 7500 實時熒光定量 PCR 儀（Applied Biosystems 7500 Real-Time PCR System）是由賽默飛世爾科技開發(fā)的一款廣泛應(yīng)用于科研與臨床研究領(lǐng)域的標(biāo)準(zhǔn)型實時定量 PCR 儀器。自推出以來，該設(shè)備因其穩(wěn)定性高、數(shù)據(jù)準(zhǔn)確、功能實用而被全球眾多實驗室采用。它結(jié)合先進(jìn)的熱控系統(tǒng)、可靠的熒光檢測模塊和成熟的軟件平臺，適用于基因表達(dá)分析、病原體檢測、遺傳分析等多種分子生物學(xué)應(yīng)用。

無論是科研院校、醫(yī)院、疾病控制中心，還是食品藥品檢驗、農(nóng)業(yè)檢測機(jī)構(gòu)，ABI 7500 都是一款值得信賴的實時 PCR 平臺。特別是在二手設(shè)備市場上，其性價比優(yōu)勢尤為明顯。

二、主要技術(shù)特性

1. 五通道熒光檢測系統(tǒng)

ABI 7500 擁有五色通道系統(tǒng)，支持多種熒光染料檢測，如 FAM、VIC、ROX、TAMRA 和 SYBR Green，兼容多重 PCR 檢測，能夠滿足用戶在復(fù)雜多靶點檢測方面的需求。熒光系統(tǒng)采用高效激發(fā)光源和濾光片組，確保信號識別靈敏，降低背景干擾，提升數(shù)據(jù)準(zhǔn)確性。

2. 高精度溫控平臺

儀器配備高性能帕爾貼熱循環(huán)模塊，可實現(xiàn)快速升降溫控制，溫控均一性優(yōu)于 ±0.25°C，確保所有樣本孔的反應(yīng)環(huán)境一致。該特性是實現(xiàn)高重復(fù)性結(jié)果的關(guān)鍵。

3. 快速反應(yīng)時間

標(biāo)準(zhǔn)版本的 ABI 7500 反應(yīng)程序大約需兩個小時完成一個運行周期。針對時間敏感場景，用戶也可選用 Fast 模塊升級（7500 Fast 系列），進(jìn)一步壓縮反應(yīng)時間至40分鐘左右。

4. 軟件功能強(qiáng)大

ABI 7500 配套使用 SDS 軟件（System Detection Software），現(xiàn)多數(shù)實驗室已升級至 7500 v2.3 或兼容 QuantStudio 軟件。該軟件提供：

• 標(biāo)準(zhǔn)曲線定量分析

• 相對定量分析（ΔΔCt 方法）

• 熔解曲線分析

• SNP 分型

• CT 值自動判定及基線/閾值調(diào)整

• 曲線擬合、熒光圖形導(dǎo)出、報告生成

軟件操作邏輯清晰，支持模板保存、批量數(shù)據(jù)導(dǎo)出、圖像和數(shù)值一鍵導(dǎo)出等功能，是用戶數(shù)據(jù)分析的重要保障。

5. 樣品處理能力

ABI 7500 使用標(biāo)準(zhǔn)的 96 孔光學(xué)板，適用于常規(guī)樣本通量分析，單次可處理 96 個反應(yīng)體系，滿足大部分科研和檢測單位的需求。

三、技術(shù)參數(shù)一覽

• 通量支持：96孔標(biāo)準(zhǔn)光學(xué)反應(yīng)板

• 熒光通道：5通道（FAM、VIC、ROX、SYBR Green、TAMRA）

• 光源系統(tǒng)：長壽命高強(qiáng)度氙燈（或 LED 版本視機(jī)型而定）

• 檢測器類型：高靈敏 CCD 攝像系統(tǒng)

• 升溫速度：約 2.5°C/秒（標(biāo)準(zhǔn)版）

• 反應(yīng)體系體積：10–100 μL

• 熱控精度：±0.1°C

• 溫度均一性：≤ ±0.25°C（孔間差）

• 操作系統(tǒng)兼容：Windows 7、10

• 數(shù)據(jù)接口：USB、LAN、RS-232 串口

四、典型應(yīng)用領(lǐng)域

1. 基因表達(dá)分析

配合反轉(zhuǎn)錄 PCR（RT-PCR）技術(shù)，ABI 7500 可用于細(xì)胞或組織樣本中基因的表達(dá)量定量分析，適用于疾病機(jī)制研究、藥物篩選和表型研究。

2. 病原體定量檢測

其高靈敏度和通量適中特點，廣泛應(yīng)用于病毒載量監(jiān)測、細(xì)菌定量檢測及呼吸道病原核酸分析。例如，新冠病毒核酸檢測中，ABI 7500 常作為主力平臺。

3. 遺傳分析與突變檢測

通過 TaqMan 探針結(jié)合 SNP 分型方法，設(shè)備可實現(xiàn)個體基因型判別，是藥物代謝基因、腫瘤突變篩查等領(lǐng)域的重要工具。

4. 食品與環(huán)境安全檢測

可用于檢測轉(zhuǎn)基因成分、致病菌污染、生物毒素或動物源成分殘留，支持多靶點定量分析，符合監(jiān)管標(biāo)準(zhǔn)。

5. 藥品研發(fā)和質(zhì)量控制

在生物制藥與疫苗研發(fā)過程中，用于檢測表達(dá)載體穩(wěn)定性、病毒純度、污染物排查等關(guān)鍵指標(biāo)，是 GMP 環(huán)境下常見的核酸檢測平臺。

五、如何選擇二手 ABI 7500 儀器

ABI 7500 是一款經(jīng)久耐用的 PCR 平臺，許多型號在正確維護(hù)下可連續(xù)使用10年以上。選購二手設(shè)備時應(yīng)重點關(guān)注以下幾個方面：

1. 檢查儀器外觀和結(jié)構(gòu)完整性

觀察設(shè)備外殼是否有裂痕、氧化或拆卸痕跡，樣品艙是否平整清潔。查看鍵盤、屏幕是否響應(yīng)靈敏，指示燈狀態(tài)是否正常。

2. 確認(rèn)熱控與光學(xué)系統(tǒng)運行狀態(tài)

要求供應(yīng)商提供溫控測試數(shù)據(jù)、校準(zhǔn)報告和熒光通道測試曲線。檢查 CCD 相機(jī)是否可正常采集，激發(fā)燈壽命是否足夠。

3. 軟件授權(quán)完整性

確認(rèn)設(shè)備是否附帶原版 SDS 軟件及授權(quán)密鑰，避免后續(xù)使用中出現(xiàn)功能限制。此外，檢查是否能兼容新版系統(tǒng)環(huán)境（如 Windows 10）。

4. 附件配件齊全

包括樣本板架、熱蓋組件、電源線、USB線、出廠說明書等。若缺失關(guān)鍵組件，需估算額外采購成本。

5. 技術(shù)支持與服務(wù)保障

優(yōu)先選擇帶有專業(yè)檢修、質(zhì)保期和售后支持的渠道供應(yīng)商，確保故障時有渠道響應(yīng)和技術(shù)處理。

六、設(shè)備使用流程概述

1. 樣品準(zhǔn)備：配制反應(yīng)體系，加入引物、探針、模板及 Master Mix，分裝至96孔板中。

2. 封板與離心：用光學(xué)透明密封膜密封板口，短時離心去除氣泡。

3. 上機(jī)操作：將板置入樣本托架，對準(zhǔn)位置并關(guān)閉儀器蓋。

4. 軟件設(shè)置：啟動 SDS 軟件，選擇反應(yīng)通道、溫控程序、數(shù)據(jù)采集模式及樣本分組信息。

5. 運行實驗：點擊啟動，系統(tǒng)自動執(zhí)行熱循環(huán)程序并實時采集熒光信號。

6. 數(shù)據(jù)分析：結(jié)束后通過軟件查看 CT 值、熒光擴(kuò)增曲線、標(biāo)準(zhǔn)曲線、熔解曲線等，導(dǎo)出報告與結(jié)果文件。

7. 清潔與關(guān)機(jī)：實驗結(jié)束后取出樣品板，清理樣品艙，關(guān)閉設(shè)備。

七、常見問題與排查建議

八、ABI 7500 與其他 PCR 平臺對比

ABI 7500 在性能與價格間取得平衡，適合多數(shù)實驗需求，是大批量標(biāo)準(zhǔn)檢測的理想設(shè)備。

九、結(jié)語

ABI 7500 實時熒光定量 PCR 儀憑借其穩(wěn)定的性能、成熟的軟件系統(tǒng)和強(qiáng)大的多功能支持，在分子生物學(xué)研究與應(yīng)用中有著廣泛影響。即使在當(dāng)今儀器更新迭代快速的背景下，它仍舊以可靠性和易用性贏得用戶青睞。

對于預(yù)算有限但希望搭建高效核酸檢測平臺的實驗室而言，選購一臺狀態(tài)良好、配件完整、經(jīng)過校準(zhǔn)的二手 ABI 7500，將是性價比極高的選擇。在規(guī)范使用和妥善維護(hù)下，它依然能夠長期穩(wěn)定運行，助力科研與檢測工作的開展。