伯樂(Bio-Rad)MicroPulser電穿孔儀(型號(hào)1652100) 的全面介紹,全文約3000字,分為以下六大部分:產(chǎn)品概述、核心技術(shù)與性能特點(diǎn)、適用范圍與細(xì)胞類型、操作流程與注意事項(xiàng)、常見問題與維護(hù)建議,以及與競品對(duì)比與選型建議。
伯樂(Bio-Rad)MicroPulser電穿孔儀1652100是一款專為微生物、酵母和哺乳動(dòng)物細(xì)胞電轉(zhuǎn)化(電穿孔)設(shè)計(jì)的實(shí)驗(yàn)室儀器。該設(shè)備通過精確控制電壓與脈沖時(shí)間,在細(xì)胞膜上瞬間形成孔隙,使外源DNA、RNA或其他大分子物質(zhì)能夠進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)部,從而實(shí)現(xiàn)基因轉(zhuǎn)染或其他分子生物學(xué)操作。
Bio-Rad作為全球知名的生命科學(xué)儀器制造商,其MicroPulser系列因操作簡便、性能穩(wěn)定和適用性強(qiáng),在全球眾多科研院所與生物技術(shù)公司中擁有廣泛的用戶基礎(chǔ)。
MicroPulser內(nèi)置多種針對(duì)不同細(xì)胞類型的電穿孔程序,包括:
大腸桿菌(E. coli)
酵母菌(Yeast)
哺乳動(dòng)物細(xì)胞(如CHO、293T等)
植物原生質(zhì)體
每種預(yù)設(shè)程序都根據(jù)細(xì)胞膜的物理特性調(diào)配了合適的電壓、時(shí)間和波形參數(shù),用戶也可自定義電壓與電阻值,以適應(yīng)特殊實(shí)驗(yàn)需求。
該儀器采用快速放電電容放電機(jī)制,在短時(shí)間內(nèi)輸出高強(qiáng)度單個(gè)電壓脈沖,有效穿孔同時(shí)最大限度減少細(xì)胞損傷。其恒壓系統(tǒng)可精確輸出0.1kV至3.0kV的電壓,穩(wěn)定性高,保證轉(zhuǎn)染效率的可重復(fù)性。
MicroPulser配備兼容Bio-Rad Gene Pulser/Micro Pulser Cuvette Holder的電極支架,可支持0.1cm與0.2cm間隙電穿孔杯,適合不同電場強(qiáng)度要求的實(shí)驗(yàn)。此外,還支持標(biāo)準(zhǔn)1mm、2mm等規(guī)格的穿孔杯。
設(shè)備體積小巧(大約22cm x 20cm x 9cm),便于置于實(shí)驗(yàn)臺(tái)角落或超凈工作臺(tái)內(nèi)操作。前面板設(shè)有清晰的LCD顯示屏,提供參數(shù)設(shè)定與結(jié)果回讀功能,配合簡單按鍵控制,適合初學(xué)者與熟練科研人員使用。
伯樂MicroPulser廣泛適用于多種電穿孔實(shí)驗(yàn),主要包括:
大腸桿菌(常用于質(zhì)粒轉(zhuǎn)化)
沙門氏菌、志賀菌等革蘭氏陰性菌
在常規(guī)條件下使用0.1 cm間隙電穿孔杯,電壓范圍通常在1.8kV~2.5kV之間。
釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)
念珠菌屬等
通常使用0.2 cm間隙電極杯,電壓控制在1.5kV左右。
CHO細(xì)胞、HEK293、Jurkat等懸浮或貼壁細(xì)胞
可用于RNA或質(zhì)粒DNA的導(dǎo)入,適用于小規(guī)模實(shí)驗(yàn)及驗(yàn)證性轉(zhuǎn)染。
玉米、小麥、煙草原生質(zhì)體的短時(shí)高壓脈沖電穿孔
需要特別優(yōu)化的電壓與電容參數(shù)。
準(zhǔn)備細(xì)胞與DNA溶液:將細(xì)胞洗滌并重懸于適當(dāng)緩沖液(如sterile water、glycerol buffer)。
裝填穿孔杯:將細(xì)胞-質(zhì)?;旌衔镛D(zhuǎn)移至預(yù)冷穿孔杯中(體積一般為50μL~100μL)。
插入電極座:將穿孔杯插入儀器配套電極支架。
設(shè)定參數(shù)并啟動(dòng)穿孔:選擇細(xì)胞類型預(yù)設(shè)程序或手動(dòng)設(shè)定脈沖電壓與時(shí)間。
處理后培養(yǎng):立即將穿孔產(chǎn)物轉(zhuǎn)移至恢復(fù)培養(yǎng)基中,按實(shí)驗(yàn)流程培養(yǎng)。
避免氣泡:穿孔液中存在氣泡會(huì)引發(fā)電弧放電,導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗。
控制細(xì)胞濃度:過高或過低的細(xì)胞密度都會(huì)影響轉(zhuǎn)染效率與生存率。
電極杯需預(yù)冷:通常于4°C冰盒中冷卻,以減少熱效應(yīng)對(duì)細(xì)胞的損傷。
嚴(yán)禁連續(xù)操作:高壓脈沖后設(shè)備需短時(shí)間冷卻,避免過熱影響壽命。
問題 | 可能原因 | 解決方案 |
---|---|---|
電弧放電 | 杯中有氣泡或液體體積不足 | 檢查是否正確操作,重新加樣并排氣泡 |
無法啟動(dòng)程序 | 電極座未插牢或接觸不良 | 重新插入并確認(rèn)固定 |
轉(zhuǎn)染效率低 | 電壓設(shè)置不合適或細(xì)胞狀態(tài)不佳 | 優(yōu)化參數(shù)或更換細(xì)胞批次 |
設(shè)備無響應(yīng) | 電源故障或保險(xiǎn)絲燒毀 | 檢查電源連接,聯(lián)系廠家售后 |
每次使用后用70%酒精擦拭電極支架與外殼;
定期更換穿孔杯,避免重復(fù)使用影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果;
存放在干燥無腐蝕性氣體的環(huán)境中;
每年進(jìn)行一次廠方推薦的性能檢測與校準(zhǔn)。
品牌/型號(hào) | 最大電壓 | 適用細(xì)胞 | 是否預(yù)設(shè)程序 | 價(jià)格區(qū)間 |
---|---|---|---|---|
Bio-Rad MicroPulser 1652100 | 3.0kV | 細(xì)菌/酵母/哺乳動(dòng)物 | 有 | 中等 |
Invitrogen Neon Transfection | 2.3kV | 哺乳動(dòng)物細(xì)胞專用 | 有 | 略高 |
Eppendorf Multiporator | 3.0kV | 多種細(xì)胞 | 有 | 高 |
BTX ECM399 | 2.5kV | 細(xì)菌/真核細(xì)胞 | 有 | 略低 |
如果你的實(shí)驗(yàn)側(cè)重于細(xì)菌與酵母等微生物的高效轉(zhuǎn)化,同時(shí)需要一定程度的哺乳動(dòng)物細(xì)胞適應(yīng)性,Bio-Rad MicroPulser是一款性價(jià)比較高的通用選擇;
對(duì)于專注哺乳動(dòng)物高效率基因編輯實(shí)驗(yàn),可考慮Neon等更高精度系統(tǒng);
對(duì)預(yù)算有限、只進(jìn)行基礎(chǔ)轉(zhuǎn)化操作的實(shí)驗(yàn)室而言,MicroPulser具有操作簡便、壽命長、用戶評(píng)價(jià)高等優(yōu)勢,適合作為入門或常規(guī)操作儀器。
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