Bio-Rad 伯樂 MicroPulser 電穿孔儀 的詳細(xì)介紹，全文從設(shè)備功能、技術(shù)原理、性能參數(shù)、應(yīng)用領(lǐng)域、操作流程、注意事項和使用建議等多維展開，適合科研人員、教學(xué)實驗室和生物技術(shù)公司參考使用或采購前了解。

Bio-Rad MicroPulser 電穿孔儀全方位介紹

一、設(shè)備簡介

MicroPulser 電穿孔儀 是 Bio-Rad 公司為實驗室小體積電穿孔實驗開發(fā)的一款高效、便攜、智能的電轉(zhuǎn)染工具。該設(shè)備主要適用于原核微生物、酵母菌、真核細(xì)胞（如哺乳動物細(xì)胞）以及植物原生質(zhì)體等細(xì)胞類型的外源基因?qū)雽嶒灐?/p>

通過對細(xì)胞施加短暫的高壓電脈沖，MicroPulser 能夠瞬間改變細(xì)胞膜的通透性，產(chǎn)生可逆性微孔，從而使DNA、RNA、siRNA、蛋白質(zhì)等分子物質(zhì)進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)或細(xì)胞核中，完成基因轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)染或編輯任務(wù)。

其最大特點是：結(jié)構(gòu)緊湊、操作簡單、轉(zhuǎn)染效率高、適用范圍廣、故障率低，適合基礎(chǔ)研究與日常分子生物學(xué)實驗室使用。

二、工作原理簡述

電穿孔技術(shù)的核心是電致孔效應(yīng)（electroporation）。當(dāng)細(xì)胞暴露于強(qiáng)電場中時，細(xì)胞膜脂雙層結(jié)構(gòu)因電介質(zhì)擊穿而在局部形成暫時性孔洞。外源物質(zhì)便可借助電滲、電泳或被動擴(kuò)散等機(jī)制穿透這些孔洞進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)部。隨后，細(xì)胞膜會自然修復(fù)，孔洞關(guān)閉，細(xì)胞恢復(fù)正常生理活動。

這種方式相較于病毒介導(dǎo)、化學(xué)轉(zhuǎn)染等手段，更安全、適用性更廣，并且對非模式生物或難轉(zhuǎn)染細(xì)胞更為友好。

三、技術(shù)規(guī)格參數(shù)

四、主要性能特點

1. 預(yù)設(shè)程序，輕松上手

MicroPulser 內(nèi)置優(yōu)化程序，涵蓋了大多數(shù)常見細(xì)胞類型：

• 大腸桿菌（E. coli）

• 釀酒酵母（S. cerevisiae）

• 哺乳動物細(xì)胞（如CHO、293T、HeLa）

• 植物原生質(zhì)體等

無需自行調(diào)試參數(shù)，新手實驗人員也能快速獲得高效轉(zhuǎn)染結(jié)果。

2. 電壓精度高、輸出穩(wěn)定

采用穩(wěn)定恒壓電源，避免電流波動導(dǎo)致細(xì)胞損傷。輸出電壓誤差控制在±1%，確保不同批次實驗的可重復(fù)性。

3. 安全電弧抑制系統(tǒng)

內(nèi)置防電弧系統(tǒng)，檢測到穿孔液導(dǎo)電性異常、樣品氣泡等情況時自動停止放電，保護(hù)細(xì)胞和儀器不受損。

4. 緊湊體積，易于集成

適合置于超凈工作臺、生物安全柜或標(biāo)準(zhǔn)實驗操作臺上，節(jié)省空間，支持在無菌環(huán)境下直接完成轉(zhuǎn)染操作。

五、適用場景與細(xì)胞類型

六、標(biāo)準(zhǔn)操作流程

步驟一：準(zhǔn)備細(xì)胞與材料

• 細(xì)胞應(yīng)處于對數(shù)生長期，狀態(tài)良好；

• 使用無離子緩沖液（如純水+甘油）重懸；

• 外源質(zhì)?；騌NA應(yīng)無鹽、濃度合適；

• 預(yù)冷穿孔杯至4°C，減少熱應(yīng)激。

步驟二：裝填樣品

• 在穿孔杯中加入50–100 μL細(xì)胞-質(zhì)?；旌弦?；

• 去除樣品氣泡（使用槍頭輕彈杯體）；

• 插入設(shè)備電極支架，確保對齊。

步驟三：設(shè)定程序與放電

• 選擇適配細(xì)胞的預(yù)設(shè)程序或手動設(shè)定電壓；

• 按下“Pulse”鍵；

• 屏幕會顯示脈沖完成與時間常數(shù)；

• 若出現(xiàn)電弧提示，停止實驗并重新準(zhǔn)備樣品。

步驟四：轉(zhuǎn)移與恢復(fù)培養(yǎng)

• 快速將細(xì)胞轉(zhuǎn)移至37°C預(yù)熱的恢復(fù)培養(yǎng)液；

• 通常孵育30–60分鐘后接種平板或進(jìn)行檢測；

• 可加入適當(dāng)抗生素篩選陽性菌落。

七、常見問題與應(yīng)對方法

八、實驗優(yōu)化建議

• 使用新鮮、活性高的細(xì)胞；

• 樣品混合后預(yù)冷可增強(qiáng)細(xì)胞存活率；

• 初次實驗推薦建立“陽性對照”作為效率基準(zhǔn)；

• 電極杯建議單次使用，避免交叉污染；

• 每次實驗記錄參數(shù)與結(jié)果，建立實驗數(shù)據(jù)庫。

九、設(shè)備維護(hù)與保養(yǎng)

• 使用后擦拭設(shè)備表面及電極接口；

• 不得使用強(qiáng)酸、丙酮等腐蝕性溶液清潔；

• 長時間不使用時，應(yīng)拔掉電源、置于干燥通風(fēng)環(huán)境；

• 每季度檢查電極是否氧化變色，必要時更換；

• 年度維護(hù)建議提交廠商進(jìn)行電壓穩(wěn)定性檢測與校準(zhǔn)。

十、總結(jié)

Bio-Rad MicroPulser 電穿孔儀作為一款高性價比、易于操作、適配性強(qiáng)的實驗室電轉(zhuǎn)設(shè)備，適合日常的分子克隆、轉(zhuǎn)基因構(gòu)建、RNA干擾、蛋白表達(dá)、免疫細(xì)胞處理等多類科研場景。其優(yōu)良的設(shè)計與性能，使其在全球數(shù)千家高校、研究機(jī)構(gòu)和生物公司中獲得廣泛應(yīng)用。