伯樂(Bio-Rad)Gene Pulser Xcell? 電穿孔系統(tǒng) 的詳細(xì)介紹,篇幅約3000字,內(nèi)容圍繞其設(shè)計(jì)架構(gòu)、技術(shù)性能、應(yīng)用領(lǐng)域、模塊配置、操作方法與實(shí)驗(yàn)優(yōu)化等進(jìn)行全面展開,適合科研實(shí)驗(yàn)室、醫(yī)院轉(zhuǎn)化平臺(tái)和高端研發(fā)人員使用或采購前了解。
Gene Pulser Xcell? 電穿孔系統(tǒng) 是 Bio-Rad(伯樂)推出的一款高性能、高靈活性、多功能的電穿孔儀平臺(tái),廣泛應(yīng)用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞、細(xì)菌、酵母、昆蟲、植物原生質(zhì)體等各類細(xì)胞的轉(zhuǎn)染或轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)中。該系統(tǒng)特別適合進(jìn)行高效率質(zhì)粒導(dǎo)入、CRISPR編輯系統(tǒng)轉(zhuǎn)染、siRNA轉(zhuǎn)染、蛋白/寡核苷酸導(dǎo)入等復(fù)雜操作,具有高度可調(diào)節(jié)性和模塊拓展能力。
與基礎(chǔ)型號(hào) MicroPulser 相比,Gene Pulser Xcell 屬于旗艦型電穿孔系統(tǒng),其可通過不同模塊組合實(shí)現(xiàn)指數(shù)衰減波和方波輸出、并適配多種實(shí)驗(yàn)需求。
Gene Pulser Xcell 電穿孔系統(tǒng)的核心由以下幾個(gè)模塊組成:
高精度電壓和電容控制;
配備大型LCD液晶屏;
集成多種安全機(jī)制與診斷系統(tǒng);
支持三種不同模塊接入(ECM、PC、CU)。
模塊名稱 | 功能說明 |
---|---|
ECM Module | 哺乳動(dòng)物細(xì)胞專用,輸出方波電場(chǎng)(Square Wave),適合貼壁/懸浮細(xì)胞轉(zhuǎn)染。 |
PC Module | 微生物電穿孔模塊,輸出指數(shù)衰減波形,適合大腸桿菌、酵母等轉(zhuǎn)化。 |
CU Module | 通用電容單元,控制電容量大?。?5 μF / 50 μF / 125 μF)。 |
用戶可按需求選擇組合,獲得最大的靈活性和應(yīng)用廣度。
項(xiàng)目 | 參數(shù)范圍與說明 |
---|---|
電壓范圍 | 10 V – 3000 V(以10 V步進(jìn)) |
方波脈沖持續(xù)時(shí)間 | 10 μs – 10,000 μs |
電阻設(shè)置(方波) | 50 – 1000 Ω |
電容設(shè)置(指數(shù)波) | 25 μF / 50 μF / 125 μF |
輸出波形 | 方波或指數(shù)衰減波,用戶可選 |
單次/多次脈沖模式 | 支持 |
支持穿孔杯間隙 | 0.1 cm / 0.2 cm / 0.4 cm / 0.8 cm |
兼容電擊槽 | Bio-Rad專用 cuvette holder(提供穩(wěn)定性和接地保護(hù)) |
存儲(chǔ)功能 | 可保存≥100個(gè)自定義程序 |
外設(shè)接口 | 可連接打印機(jī)、電腦導(dǎo)出實(shí)驗(yàn)參數(shù) |
Gene Pulser Xcell 是一款全能型系統(tǒng),涵蓋的實(shí)驗(yàn)范圍如下:
適用于如HEK293、CHO、Jurkat、U937等懸浮或貼壁細(xì)胞;
可轉(zhuǎn)入質(zhì)粒、siRNA、mRNA、CRISPR-Cas9系統(tǒng)。
大腸桿菌、沙門氏菌、乳酸菌等的質(zhì)粒導(dǎo)入;
酵母線性DNA導(dǎo)入,用于基因敲除/補(bǔ)救實(shí)驗(yàn)。
植物原生質(zhì)體GFP表達(dá)或代謝路徑轉(zhuǎn)化;
Sf9/Sf21等昆蟲細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)的DNA導(dǎo)入。
用于T細(xì)胞、DC細(xì)胞等免疫細(xì)胞外源核酸導(dǎo)入;
應(yīng)用于疫苗載體構(gòu)建或細(xì)胞治療研發(fā)。
細(xì)胞應(yīng)處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期;
使用無離子緩沖液重懸(避免PBS等高鹽溶液);
核酸濃度根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)設(shè)定,通常為10–100 μg/mL。
取穿孔杯加入細(xì)胞-核酸混合液(50–100 μL);
去氣泡并確認(rèn)液面高度合適。
選擇 ECM 模塊用于哺乳動(dòng)物,或 PC 模塊用于細(xì)菌;
可調(diào)用預(yù)設(shè)方案或手動(dòng)設(shè)定電壓、電阻、電容、脈沖時(shí)間等。
插入穿孔杯并對(duì)準(zhǔn);
按下“Pulse”鍵觸發(fā)電脈沖;
屏幕實(shí)時(shí)顯示脈沖參數(shù)、時(shí)間、曲線狀態(tài)。
立即轉(zhuǎn)移至恢復(fù)液中孵育(如抗生素預(yù)處理培養(yǎng)基);
進(jìn)行下游培養(yǎng)、篩選或檢測(cè)。
優(yōu)勢(shì)維度 | Gene Pulser Xcell 的表現(xiàn) |
---|---|
多功能性 | 方波與指數(shù)波兼具,兼容不同細(xì)胞類型 |
擴(kuò)展性強(qiáng) | 模塊化設(shè)計(jì),適配不同研究需求 |
參數(shù)精度高 | 可精細(xì)調(diào)控每一個(gè)脈沖細(xì)節(jié) |
數(shù)據(jù)可追溯 | 程序存儲(chǔ)功能,便于實(shí)驗(yàn)溯源與重復(fù)性控制 |
用戶友好 | 大屏顯示、清晰按鈕操作,含警報(bào)系統(tǒng)和溫控保護(hù) |
對(duì)于貼壁細(xì)胞,使用方波模式時(shí)脈沖時(shí)間宜短(200–400 μs);
siRNA轉(zhuǎn)染建議使用較低電壓(100–200 V)防止細(xì)胞毒性;
多次電脈沖模式(multi-pulse)適合質(zhì)粒與siRNA共轉(zhuǎn)染。
問題現(xiàn)象 | 可能原因 | 對(duì)策 |
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電弧發(fā)生 | 氣泡、液體體積不足 | 增加液體體積、去氣泡 |
細(xì)胞死亡率高 | 電壓過高、緩沖液導(dǎo)電強(qiáng) | 降低電壓、更換緩沖液 |
脈沖無響應(yīng) | 模塊連接松動(dòng)、電極污染 | 檢查模塊插槽、清潔電極 |
參數(shù)失控 | 自定義程序設(shè)置沖突 | 重置或重新設(shè)定程序 |
國(guó)家級(jí)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室、生物醫(yī)藥企業(yè)研發(fā)中心;
轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室、腫瘤免疫平臺(tái)、疫苗研究機(jī)構(gòu);
高?;蚬こ獭⒓?xì)胞生物、合成生物學(xué)教學(xué)實(shí)驗(yàn)室。
對(duì)比項(xiàng) | Gene Pulser Xcell | MicroPulser |
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電壓控制 | 高精度可編程(10–3000 V) | 步進(jìn)電壓(200–3000 V) |
輸出波形 | 方波 + 指數(shù)波(可選) | 僅指數(shù)衰減波 |
應(yīng)用廣度 | 全細(xì)胞類型,尤其適合哺乳動(dòng)物 | 主要為細(xì)菌、酵母等微生物 |
參數(shù)調(diào)控 | 多維可調(diào)(R/C/V/Time) | 電壓為主,時(shí)間固定 |
模塊擴(kuò)展 | 支持多個(gè)模塊組合 | 一體式固定結(jié)構(gòu) |
售價(jià)范圍 | 中高端 | 中低端 |
Gene Pulser Xcell? 電穿孔系統(tǒng) 是一款高度靈活、精準(zhǔn)可控、應(yīng)用范圍廣的電穿孔平臺(tái),能夠滿足從基礎(chǔ)研究到復(fù)雜細(xì)胞操作的全鏈路需求。其模塊化設(shè)計(jì)不僅提升了系統(tǒng)兼容性,也便于后續(xù)升級(jí)拓展,適合實(shí)驗(yàn)室建立長(zhǎng)期電穿孔實(shí)驗(yàn)體系。
無論您從事的是病毒替代轉(zhuǎn)染、CRISPR基因編輯、細(xì)胞藥物遞送,或教學(xué)演示與研究,Gene Pulser Xcell 都是值得信賴的電轉(zhuǎn)利器。
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