賽默飛分光光度計(jì)Evolution One測(cè)量模式介紹

一、前言

分光光度計(jì)是分析化學(xué)、生命科學(xué)、臨床檢測(cè)和環(huán)境監(jiān)測(cè)中最常用的實(shí)驗(yàn)設(shè)備之一。它通過測(cè)量物質(zhì)對(duì)不同波長(zhǎng)光的吸收、透過或反射特性，實(shí)現(xiàn)對(duì)樣本成分的定性與定量分析。賽默飛Evolution One作為一款先進(jìn)的紫外-可見分光光度計(jì)，設(shè)計(jì)時(shí)充分考慮了科研和應(yīng)用檢測(cè)的多樣需求，內(nèi)置多種測(cè)量模式，用戶可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)繕?biāo)靈活選擇，既能滿足基礎(chǔ)研究的常規(guī)檢測(cè)，又能應(yīng)對(duì)復(fù)雜實(shí)驗(yàn)方案的深入分析。

二、Evolution One的測(cè)量模式分類

為了滿足不同科研和應(yīng)用場(chǎng)景的需求，Evolution One分光光度計(jì)通常支持以下幾類主要測(cè)量模式：

1. 光譜掃描模式（Spectrum Scan）

2. 定量測(cè)定模式（Quantitative Analysis）

3. 動(dòng)力學(xué)測(cè)定模式（Kinetics）

4. 時(shí)間掃描模式（Time Scan）

5. DNA/RNA與蛋白質(zhì)專用模式

6. 多波長(zhǎng)測(cè)定模式（Multi-Wavelength）

7. 光度模式（Photometric Mode）

8. 方法開發(fā)與自定義模式

下面將對(duì)各個(gè)模式的原理、操作方法、應(yīng)用價(jià)值進(jìn)行詳細(xì)介紹。

三、光譜掃描模式

1. 原理

光譜掃描模式主要用于測(cè)定樣品在一定波長(zhǎng)范圍內(nèi)的吸收或透過特性。通過對(duì)190–1100 nm范圍的連續(xù)掃描，可以獲得完整的光譜曲線，幫助研究者判斷物質(zhì)的特征吸收峰。

2. 操作流程

• 設(shè)置掃描波長(zhǎng)范圍，例如200–800 nm；

• 選擇掃描速度與數(shù)據(jù)間隔；

• 插入樣品與空白對(duì)照；

• 儀器自動(dòng)繪制吸收光譜曲線。

3. 應(yīng)用案例

• 蛋白質(zhì)和核酸最大吸收峰位置的確認(rèn)；

• 染料、涂料、顏料的光譜特征分析；

• 藥物溶液穩(wěn)定性研究。

四、定量測(cè)定模式

1. 原理

基于比爾-朗伯定律（A=ε·c·l），通過吸光度與濃度的線性關(guān)系建立標(biāo)準(zhǔn)曲線，對(duì)未知樣品進(jìn)行濃度測(cè)定。

2. 操作流程

• 準(zhǔn)備系列標(biāo)準(zhǔn)溶液，測(cè)定其吸光度；

• 軟件自動(dòng)生成標(biāo)準(zhǔn)曲線；

• 輸入未知樣品數(shù)據(jù)，儀器計(jì)算濃度。

3. 應(yīng)用案例

• 測(cè)定DNA或RNA樣本濃度；

• 藥物活性成分的定量檢測(cè)；

• 食品中添加劑或營養(yǎng)成分的濃度分析。

五、動(dòng)力學(xué)測(cè)定模式

1. 原理

動(dòng)力學(xué)測(cè)定主要記錄樣品吸光度隨時(shí)間變化的過程，常用于酶動(dòng)力學(xué)研究。通過設(shè)定時(shí)間間隔和總時(shí)長(zhǎng)，儀器可自動(dòng)生成動(dòng)力學(xué)曲線。

2. 操作流程

• 選擇目標(biāo)波長(zhǎng)（通常為底物或產(chǎn)物的最大吸收峰）；

• 設(shè)置測(cè)量間隔（如每5秒測(cè)定一次）；

• 加入酶和底物，立即開始測(cè)試；

• 儀器輸出反應(yīng)曲線，可計(jì)算反應(yīng)速率。

3. 應(yīng)用案例

• 酶活性檢測(cè)與動(dòng)力學(xué)參數(shù)計(jì)算；

• 藥物代謝速率研究；

• 環(huán)境樣品中生物反應(yīng)監(jiān)測(cè)。

六、時(shí)間掃描模式

1. 原理

與動(dòng)力學(xué)類似，但時(shí)間掃描通常用于長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控某一波長(zhǎng)下樣本信號(hào)的變化，適合穩(wěn)定性研究。

2. 操作流程

• 設(shè)定固定波長(zhǎng)，如260 nm；

• 設(shè)置掃描時(shí)間段（幾分鐘至數(shù)小時(shí)）；

• 儀器連續(xù)采集吸光度信號(hào)并繪制時(shí)間曲線。

3. 應(yīng)用案例

• 藥物溶液在光照或儲(chǔ)存條件下的穩(wěn)定性；

• 納米材料在分散介質(zhì)中的聚集行為；

• 生物反應(yīng)過程的長(zhǎng)時(shí)間跟蹤。

七、DNA/RNA與蛋白質(zhì)專用模式

1. 原理

核酸和蛋白質(zhì)有特定的吸收峰：DNA和RNA在260 nm吸收最強(qiáng)，蛋白質(zhì)在280 nm吸收最強(qiáng)。通過比值（A260/A280），可以判斷樣品純度。

2. 操作流程

• 選擇核酸或蛋白質(zhì)模式；

• 設(shè)定檢測(cè)體積，可支持微量比色皿（僅幾微升）；

• 軟件自動(dòng)計(jì)算濃度和純度指標(biāo)。

3. 應(yīng)用案例

• 分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中的DNA/RNA提取質(zhì)量控制；

• 蛋白質(zhì)純化過程的定量分析；

• 轉(zhuǎn)基因研究和臨床樣本檢測(cè)。

八、多波長(zhǎng)測(cè)定模式

1. 原理

在多個(gè)特定波長(zhǎng)同時(shí)測(cè)量吸光度，適用于復(fù)雜樣本中多組分的檢測(cè)。

2. 操作流程

• 選擇2–6個(gè)波長(zhǎng)；

• 設(shè)置樣本數(shù)量；

• 儀器自動(dòng)輸出多波長(zhǎng)數(shù)據(jù)，并可進(jìn)行多元分析。

3. 應(yīng)用案例

• 食品添加劑的混合組分檢測(cè)；

• 多組分藥物制劑的含量分析；

• 環(huán)境樣品中多污染物的監(jiān)測(cè)。

九、光度模式

1. 原理

光度模式是最基礎(chǔ)的功能，用于在單一波長(zhǎng)下測(cè)定樣品的吸光度或透光率，適合快速檢測(cè)。

2. 操作流程

• 選擇單一波長(zhǎng)；

• 插入空白和樣品比色皿；

• 儀器顯示吸光度（Abs）或透過率（%T）。

3. 應(yīng)用案例

• 快速測(cè)定溶液濃度；

• 質(zhì)量控制中的常規(guī)檢測(cè)；

• 現(xiàn)場(chǎng)實(shí)驗(yàn)的快速篩查。

十、方法開發(fā)與自定義模式

1. 原理

該模式允許用戶根據(jù)特定需求自定義實(shí)驗(yàn)步驟和分析方法，尤其適合非標(biāo)準(zhǔn)化樣品和復(fù)雜研究任務(wù)。

2. 功能特點(diǎn)

• 自定義掃描范圍、步長(zhǎng)、速度；

• 支持多參數(shù)分析與批量測(cè)試；

• 可保存方法并重復(fù)調(diào)用，適合長(zhǎng)期研究。

3. 應(yīng)用案例

• 新型藥物篩選；

• 復(fù)雜體系的光學(xué)行為研究；

• 高通量實(shí)驗(yàn)室的數(shù)據(jù)自動(dòng)化采集。

十一、各模式的優(yōu)勢(shì)對(duì)比

十二、未來發(fā)展趨勢(shì)

1. 智能化與自動(dòng)化
   未來分光光度計(jì)將進(jìn)一步結(jié)合AI算法，自動(dòng)識(shí)別光譜特征，減少人工操作。

2. 微量與高通量
   支持納升級(jí)樣品檢測(cè)和多孔板測(cè)量，滿足分子生物學(xué)和藥物篩選需求。

3. 遠(yuǎn)程監(jiān)控與云數(shù)據(jù)
   實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)可直接上傳至云端，實(shí)現(xiàn)遠(yuǎn)程分析和團(tuán)隊(duì)共享。

4. 多功能集成
   可能與熒光、化學(xué)發(fā)光等檢測(cè)方式結(jié)合，形成一體化分析平臺(tái)。

十三、結(jié)語

賽默飛分光光度計(jì)Evolution One憑借其多樣化的測(cè)量模式，極大地拓展了實(shí)驗(yàn)室的研究與檢測(cè)能力。從基礎(chǔ)的單波長(zhǎng)光度測(cè)試到復(fù)雜的動(dòng)力學(xué)與多組分分析，每一種模式都服務(wù)于特定實(shí)驗(yàn)需求，確保用戶能夠高效、精準(zhǔn)地獲取所需數(shù)據(jù)。這種靈活性與可靠性不僅提升了科研工作的效率，也推動(dòng)了生命科學(xué)、醫(yī)學(xué)、環(huán)境監(jiān)測(cè)和工業(yè)質(zhì)量控制等多個(gè)領(lǐng)域的發(fā)展。