賽默飛BioMate 160分光光度計是一款高性能紫外-可見光分析儀器,廣泛應(yīng)用于核酸蛋白定量、藥物分析、環(huán)境監(jiān)測、食品檢測和材料研究等領(lǐng)域。為了保證檢測結(jié)果的準確性和操作過程的安全性,使用人員必須掌握系統(tǒng)、規(guī)范的操作步驟。本文將從操作準備、開機流程、樣品測定、數(shù)據(jù)處理、關(guān)機與維護等方面,全面介紹BioMate 160的操作流程,幫助實驗人員高效完成各類實驗。
實驗環(huán)境:儀器應(yīng)放置在穩(wěn)固的實驗臺上,遠離陽光直射與強磁場干擾。
溫濕度條件:建議溫度20–25℃,濕度40%–70%,避免過濕或過干對光學(xué)系統(tǒng)造成影響。
電源:使用220V ±10%的交流電,配合穩(wěn)壓電源,確保供電穩(wěn)定。
外觀檢查:確認設(shè)備外殼無裂痕、接口無松動,顯示屏無異常。
光源檢查:氘燈與鎢燈累計使用時間需記錄在冊,若接近壽命需提前更換。
樣品室檢查:內(nèi)部無液體殘留和灰塵,比色皿座清潔完整。
標準比色皿或微量比色池。
待測樣品與空白對照溶液。
擦拭鏡頭紙與無水乙醇。
數(shù)據(jù)記錄本或外接電腦存儲介質(zhì)。
接通電源,按下電源開關(guān)。
設(shè)備自動進入自檢程序,顯示屏出現(xiàn)初始化界面。
儀器預(yù)熱20–30分鐘,保證光源穩(wěn)定。
語言選擇:根據(jù)實驗室習(xí)慣選擇中文或英文操作界面。
日期與時間校正:確保數(shù)據(jù)記錄準確。
用戶登錄:若啟用分級權(quán)限,需輸入相應(yīng)賬號與密碼。
使用標準濾光片或氘燈發(fā)射線進行校準。
確保偏差小于±1 nm,否則需進行調(diào)整。
將空白溶液加入比色皿,放置于樣品室。
選擇“空白”功能,系統(tǒng)自動記錄透過率或吸光度零點。
確保比色皿外壁干凈透明,避免影響光路。
設(shè)置目標波長,例如260 nm測定核酸濃度。
插入樣品比色皿,儀器顯示吸光度或透過率值。
可選擇濃度計算模式,系統(tǒng)自動換算結(jié)果。
設(shè)定掃描范圍(如200–800 nm)。
設(shè)定步長(0.5–1 nm)與掃描速度。
啟動掃描,儀器繪制完整光譜曲線。
將結(jié)果保存至內(nèi)部存儲或?qū)С鲋镣獠吭O(shè)備。
設(shè)定目標波長與采樣時間間隔(如10秒/點)。
放入反應(yīng)體系樣品,啟動時間掃描。
儀器實時繪制吸光度隨時間變化曲線。
可自動計算初始速率、反應(yīng)常數(shù)等參數(shù)。
選擇定量功能,輸入標準曲線濃度與對應(yīng)吸光度。
系統(tǒng)自動生成回歸曲線(直線或多項式擬合)。
測定未知樣品吸光度后,儀器自動計算濃度結(jié)果。
選擇多個波長(如260 nm與280 nm),分別測量樣品。
系統(tǒng)計算比值(如A260/A280),評估核酸或蛋白純度。
同一樣品在兩種條件下測定吸收光譜。
選擇“差譜”功能,系統(tǒng)輸出差分結(jié)果。
可用于檢測弱吸收峰或環(huán)境變化對樣品的影響。
實驗結(jié)果可保存于儀器內(nèi)置存儲器。
通過USB接口導(dǎo)出至U盤或電腦。
內(nèi)置軟件支持基線校正、平滑處理、峰值檢索等功能。
可生成表格、光譜圖,并進行統(tǒng)計計算。
Excel、CSV、圖像格式均可導(dǎo)出。
支持與LIMS系統(tǒng)對接,便于實驗室數(shù)據(jù)管理。
移除比色皿,用去離子水清洗并擦干。
若使用了易污染的樣品,需用乙醇清洗樣品室。
在軟件中選擇“關(guān)機”命令,關(guān)閉光源。
待風(fēng)扇停止后,關(guān)閉總電源。
覆蓋防塵罩,保持儀器清潔。
每次實驗后檢查樣品室和比色皿。
每周記錄光源使用時間,及時更換老化燈管。
定期進行波長和光度校準。
比色皿方向:刻度面始終朝向光源同一方向。
光源預(yù)熱:氘燈至少需20分鐘預(yù)熱,否則會導(dǎo)致數(shù)據(jù)不穩(wěn)。
溶液體積:液面高度必須高于光路,避免檢測失敗。
避免振動:實驗過程中不得隨意移動儀器。
定期維護:建議每年由廠家工程師進行一次全面保養(yǎng)。
檢查比色皿是否有水珠或污漬。
確認空白溶液是否新鮮。
檢查光源是否接近壽命極限。
樣品室是否有灰塵或指紋污染。
核實標準曲線是否重新建立。
檢查樣品濃度是否超出檢測線性范圍。
清理緩存或重啟儀器。
檢查USB接口是否穩(wěn)定。
賽默飛BioMate 160分光光度計操作步驟主要包括:操作前準備—開機與初始化—樣品測定—數(shù)據(jù)處理—操作后維護五大環(huán)節(jié)。每一步都直接關(guān)系到實驗結(jié)果的準確性和設(shè)備的穩(wěn)定性。通過規(guī)范的操作,實驗人員不僅能高效完成測定,還能顯著延長儀器使用壽命。對于長期應(yīng)用該設(shè)備的實驗室,建立標準化操作流程和檢查表尤為重要,可進一步提升數(shù)據(jù)的可比性和實驗室管理水平。