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賽默飛（Thermo Fisher Scientific）BioMate 160 分光光度計(jì)是一款廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)、醫(yī)學(xué)、環(huán)境監(jiān)測(cè)、藥物檢測(cè)及教學(xué)實(shí)驗(yàn)的紫外-可見分光光度計(jì)。儀器操作簡(jiǎn)便，檢測(cè)結(jié)果穩(wěn)定，但要獲得準(zhǔn)確可靠的數(shù)據(jù)，必須嚴(yán)格遵循使用注意事項(xiàng)。本文將系統(tǒng)介紹從儀器準(zhǔn)備到維護(hù)全過程中的操作要點(diǎn)，幫助實(shí)驗(yàn)人員正確使用該設(shè)備，避免因操作不當(dāng)導(dǎo)致的誤差或故障。
溫度與濕度：實(shí)驗(yàn)室應(yīng)保持在 20–25 ℃，濕度控制在 40%–60%。溫濕度過高會(huì)影響光學(xué)元件穩(wěn)定性，過低則可能產(chǎn)生靜電干擾。
電源穩(wěn)定性：電壓要求 220 V±10%，應(yīng)避免電壓波動(dòng)過大，必要時(shí)使用穩(wěn)壓電源。
環(huán)境光控制：避免強(qiáng)光直射或強(qiáng)烈散射光，以減少光學(xué)干擾。
防塵與通風(fēng)：實(shí)驗(yàn)室應(yīng)清潔，儀器周圍保持通風(fēng)，避免灰塵進(jìn)入光學(xué)系統(tǒng)。
光源檢查：氘燈和鎢燈壽命有限，應(yīng)定期檢查亮度和穩(wěn)定性。
比色皿槽檢查：確保比色皿槽內(nèi)無異物和污漬。
開機(jī)自檢：開機(jī)后觀察自檢結(jié)果，確認(rèn)光源、檢測(cè)器和電路狀態(tài)正常。
溶液澄清度：樣品必須澄清透明，若有渾濁需離心或過濾。
濃度范圍：吸光度宜控制在 0.1–1.0 范圍，過高需稀釋。
對(duì)照液準(zhǔn)備：參比溶液與樣品溶劑必須一致，以保證校準(zhǔn)準(zhǔn)確。
避免氣泡：加樣時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡，否則會(huì)影響光路。
開機(jī)后應(yīng)先選擇所需光源，并預(yù)熱 10–15 分鐘，使光源達(dá)到穩(wěn)定狀態(tài)。
不宜頻繁開關(guān)光源，以延長(zhǎng)燈泡壽命。
波長(zhǎng)應(yīng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求準(zhǔn)確設(shè)定。
波長(zhǎng)校準(zhǔn)應(yīng)定期進(jìn)行，防止偏差導(dǎo)致測(cè)定誤差。
使用石英比色皿進(jìn)行紫外檢測(cè)，使用光學(xué)玻璃比色皿進(jìn)行可見光檢測(cè)。
比色皿外壁必須保持清潔，無指紋、水滴或劃痕。
比色皿放入時(shí)方向需保持一致，以減少光程差異造成的誤差。
在正式測(cè)定前必須進(jìn)行空白校準(zhǔn)。
校準(zhǔn)液體應(yīng)為與樣品相同的溶劑或緩沖液。
樣品應(yīng)迅速測(cè)定，避免因光照或氧化造成性質(zhì)改變。
對(duì)動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)，應(yīng)保持溫度恒定，保證曲線平滑。
多次測(cè)定時(shí)，樣品應(yīng)充分混勻后再取用，避免濃度不均。
對(duì)核酸和蛋白質(zhì)檢測(cè)，應(yīng)保證純度，避免鹽離子或有機(jī)物干擾。
對(duì)細(xì)胞懸液，應(yīng)在測(cè)定前輕輕混勻，避免沉降或團(tuán)聚。
每個(gè)樣品至少重復(fù)測(cè)量三次，取平均值。
在定量實(shí)驗(yàn)中，應(yīng)先繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，再對(duì)未知樣品進(jìn)行計(jì)算。
對(duì)酶動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)，應(yīng)設(shè)定合適的采樣間隔。
對(duì)核酸檢測(cè)，需同時(shí)記錄 A260、A280 和 A230，進(jìn)行純度判斷。
對(duì)蛋白質(zhì)檢測(cè)，若采用染料法，應(yīng)在合適波長(zhǎng)（如 595 nm）檢測(cè)。
對(duì)生長(zhǎng)曲線監(jiān)測(cè)，應(yīng)定時(shí)測(cè)量 OD600，避免過度稀釋或濃縮。
每次實(shí)驗(yàn)后，應(yīng)及時(shí)清理比色皿槽，避免殘留液體腐蝕。
比色皿應(yīng)用專用清潔液清洗，并避免接觸硬物劃傷。
光學(xué)窗口應(yīng)用無塵布輕拭，嚴(yán)禁使用粗糙紙巾。
光源燈泡壽命有限，氘燈一般 1000 小時(shí)左右，應(yīng)及時(shí)更換。
定期進(jìn)行波長(zhǎng)校正和光度校正，保證數(shù)據(jù)準(zhǔn)確性。
定期檢查風(fēng)扇與散熱口，防止灰塵堵塞。
若儀器長(zhǎng)期停用，應(yīng)切斷電源，覆蓋防塵罩。
光源應(yīng)取下單獨(dú)保存，避免受潮或損壞。
吸光度異常偏高
預(yù)防：避免樣品過濃，確保比色皿干凈。
處理：適當(dāng)稀釋樣品并重新測(cè)定。
基線漂移
預(yù)防：保證光源充分預(yù)熱，保持比色皿清潔。
處理：重新進(jìn)行空白校準(zhǔn)。
重復(fù)性差
預(yù)防：規(guī)范操作，避免樣品分層。
處理：重新混勻樣品，多次取樣測(cè)定。
燈泡亮度不足
預(yù)防：減少頻繁開關(guān)燈源。
處理：更換氘燈或鎢燈。
波長(zhǎng)偏差
預(yù)防：定期進(jìn)行校準(zhǔn)。
處理：聯(lián)系專業(yè)人員進(jìn)行維護(hù)。
操作人員需佩戴實(shí)驗(yàn)服、手套和護(hù)目鏡。
對(duì)含有有毒或強(qiáng)腐蝕性樣品，應(yīng)在通風(fēng)櫥內(nèi)操作。
樣品溢出應(yīng)立即清理，避免腐蝕比色皿或儀器。
每次測(cè)定應(yīng)詳細(xì)記錄波長(zhǎng)、樣品編號(hào)、吸光度值。
對(duì)關(guān)鍵實(shí)驗(yàn)，應(yīng)保存光譜數(shù)據(jù)文件以便復(fù)查。
使用人員必須經(jīng)過培訓(xùn)，熟悉儀器原理與操作規(guī)程。
不得由未經(jīng)授權(quán)的人員私自操作或拆卸儀器。
注意比色皿使用石英材質(zhì)；
檢測(cè)前避免 RNA 降解；
A260/A280 比值應(yīng)在 1.8–2.0。
若采用紫外吸收法，避免緩沖液中含有吸收干擾物；
若采用染料法，應(yīng)在標(biāo)準(zhǔn)曲線濃度范圍內(nèi)測(cè)定。
溫度控制至關(guān)重要；
實(shí)驗(yàn)過程中保持恒溫，避免反應(yīng)速率波動(dòng)。
在 OD600 測(cè)定時(shí)，必須輕柔混勻培養(yǎng)液；
防止細(xì)胞沉淀導(dǎo)致數(shù)據(jù)失真。
自動(dòng)化升級(jí)
與自動(dòng)進(jìn)樣系統(tǒng)結(jié)合，減少人工誤差。
信息化管理
數(shù)據(jù)可直接上傳至實(shí)驗(yàn)室管理系統(tǒng)，實(shí)現(xiàn)追溯與共享。
智能診斷
儀器具備自我診斷功能，自動(dòng)提醒光源壽命與校準(zhǔn)情況。
賽默飛分光光度計(jì) BioMate 160 在科研與教學(xué)中發(fā)揮著重要作用。要確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確可靠，必須在 環(huán)境條件、樣品準(zhǔn)備、操作細(xì)節(jié)、維護(hù)保養(yǎng)、安全規(guī)范 等方面嚴(yán)格遵循使用注意事項(xiàng)。只有通過規(guī)范化管理和科學(xué)化操作，才能最大程度發(fā)揮該儀器的性能，為科研和應(yīng)用提供有力支持。
杭州實(shí)了個(gè)驗(yàn)生物科技有限公司
