賽默飛分光光度計(jì) NanoDrop Eight 操作視頻解說稿

一、開場(chǎng)介紹

歡迎進(jìn)入 NanoDrop Eight 分光光度計(jì)的操作演示。本視頻將帶領(lǐng)大家完整了解這臺(tái)設(shè)備的功能、準(zhǔn)備步驟、樣品上機(jī)方法、數(shù)據(jù)讀取與導(dǎo)出，以及日常使用中的維護(hù)與注意事項(xiàng)。通過本視頻學(xué)習(xí)，用戶能夠熟練掌握 NanoDrop Eight 的操作流程，從而高效完成核酸、蛋白質(zhì)及其他生物樣品的定量檢測(cè)。

二、設(shè)備概覽

NanoDrop Eight 是 Thermo Fisher 推出的多通道超微量分光光度計(jì)，可同時(shí)檢測(cè) 8 個(gè)樣品。它繼承了 NanoDrop 系列的“無比色皿”設(shè)計(jì)理念，僅需 1–2 微升樣品即可完成檢測(cè)，極大地節(jié)省了寶貴的實(shí)驗(yàn)材料。

設(shè)備由以下幾個(gè)部分組成：

1. 上臂與檢測(cè)平臺(tái)：上臂包含光源與檢測(cè)器，下方檢測(cè)平臺(tái)為樣品接觸區(qū)域。

2. 八通道檢測(cè)陣列：可同時(shí)加載 8 個(gè)樣品，實(shí)現(xiàn)高通量測(cè)定。

3. 觸控操作界面：直觀的圖形化菜單，便于快速設(shè)定檢測(cè)模式。

4. USB 與網(wǎng)絡(luò)接口：用于數(shù)據(jù)存儲(chǔ)、導(dǎo)出與軟件更新。

三、開機(jī)與系統(tǒng)準(zhǔn)備

1. 電源連接
   將電源適配器插入插座，按下電源鍵，系統(tǒng)啟動(dòng)進(jìn)入主界面。

2. 預(yù)熱與校準(zhǔn)
   初次開機(jī)需等待光源穩(wěn)定，約 2–3 分鐘。隨后按照屏幕提示進(jìn)行基線校準(zhǔn)，使用純水或空白緩沖液作為參比。

3. 軟件登錄
   進(jìn)入操作界面后，選擇用戶賬號(hào)。不同用戶可保存獨(dú)立方法與數(shù)據(jù)，便于實(shí)驗(yàn)室多人使用。

四、樣品準(zhǔn)備與加載

1. 樣品體積
   每孔僅需 1–2 微升，避免溶液過多導(dǎo)致覆蓋光路外溢。

2. 樣品類型
   支持核酸、蛋白質(zhì)、熒光標(biāo)記分子以及細(xì)胞懸液。

3. 樣品加載
   使用移液器小心將樣品滴加在檢測(cè)平臺(tái)的光學(xué)窗口上，避免產(chǎn)生氣泡。對(duì)于 8 通道檢測(cè)，可依次加載各孔，完成后輕合上臂。

4. 參比溶液
   在正式檢測(cè)前，需加載相應(yīng)的空白溶液作為背景校正。

五、檢測(cè)流程

1. 模式選擇
   在觸控屏幕上選擇檢測(cè)模式：核酸、蛋白質(zhì)、熒光染料或全波長(zhǎng)掃描。

2. 波長(zhǎng)設(shè)定

• 核酸檢測(cè)：常設(shè)定 260 nm。

• 蛋白檢測(cè)：常設(shè)定 280 nm。

• 熒光檢測(cè)：可在 450–650 nm 范圍內(nèi)選擇。

• 光譜掃描：可覆蓋 190–850 nm。

3. 開始檢測(cè)
   按下“Start”鍵，設(shè)備自動(dòng)完成樣品掃描。整個(gè)過程僅需 5–10 秒即可輸出結(jié)果。

4. 數(shù)據(jù)展示
   儀器會(huì)在屏幕上顯示：

• 吸光度值

• 樣品濃度

• 純度比值（A260/A280、A260/A230）

• 光譜曲線

六、數(shù)據(jù)處理與導(dǎo)出

1. 結(jié)果保存
   檢測(cè)完成后，可選擇保存結(jié)果到本地存儲(chǔ)器，并按樣品編號(hào)自動(dòng)命名。

2. 數(shù)據(jù)導(dǎo)出

• 通過 USB 移動(dòng)存儲(chǔ)導(dǎo)出數(shù)據(jù)。

• 通過網(wǎng)絡(luò)接口直接傳輸至實(shí)驗(yàn)室電腦或服務(wù)器。

• 支持生成表格、曲線圖或報(bào)告格式。

3. 多樣品比對(duì)
   軟件支持將多個(gè)樣品的光譜曲線疊加對(duì)比，用于判斷批次間差異。

七、日常維護(hù)與注意事項(xiàng)

1. 清潔
   每次測(cè)量后應(yīng)用無絨紙或柔軟布輕輕擦拭光學(xué)平臺(tái)，必要時(shí)使用去離子水或 70% 乙醇清潔。

2. 避免殘留
   蛋白質(zhì)和核酸樣品殘留會(huì)導(dǎo)致交叉污染，務(wù)必在檢測(cè)間隙清潔光學(xué)表面。

3. 光源壽命
   長(zhǎng)時(shí)間不使用時(shí)應(yīng)關(guān)閉電源，延長(zhǎng)光源壽命。

4. 定期校準(zhǔn)
   實(shí)驗(yàn)室應(yīng)根據(jù)使用頻率，定期進(jìn)行校準(zhǔn)與性能驗(yàn)證，保證數(shù)據(jù)準(zhǔn)確性。

八、典型實(shí)驗(yàn)操作案例

1. RNA 質(zhì)量控制

• 上機(jī)前準(zhǔn)備 RNA 樣品，滴加 2 微升。

• 選擇核酸模式，檢測(cè) A260/A280 值。

• 輸出結(jié)果顯示濃度為 100 ng/μL，純度比值 2.0，說明 RNA 純度較高。

2. 蛋白質(zhì)濃度檢測(cè)

• 使用 A280 吸收模式檢測(cè)蛋白溶液。

• 結(jié)果顯示濃度為 2.5 mg/mL，A260/A280 比值 0.58，符合蛋白樣品特征。

3. 熒光標(biāo)記分子檢測(cè)

• 選擇全波長(zhǎng)掃描模式，檢測(cè) 450–650 nm 區(qū)間。

• 獲得特征峰 550 nm，說明熒光分子成功標(biāo)記。

4. 高通量樣品檢測(cè)

• 一次加載 8 個(gè) DNA 樣品，幾分鐘內(nèi)完成全部檢測(cè)。

• 軟件自動(dòng)生成批量報(bào)告，便于后續(xù)分析。

九、應(yīng)用拓展

1. 分子生物學(xué)研究
   PCR、測(cè)序前的核酸濃度校正。

2. 蛋白質(zhì)組學(xué)
   蛋白質(zhì)純化產(chǎn)物濃度與純度測(cè)定。

3. 臨床檢測(cè)
   生物體液樣本的核酸、蛋白質(zhì)含量分析。

4. 藥物研發(fā)
   藥物制劑中活性分子的光譜監(jiān)測(cè)。

十、總結(jié)

通過本操作視頻介紹，我們了解了 NanoDrop Eight 的全流程使用：

• 從開機(jī)準(zhǔn)備到樣品加載；

• 從檢測(cè)模式選擇到數(shù)據(jù)輸出；

• 從日常維護(hù)到實(shí)際應(yīng)用案例。

NanoDrop Eight 的優(yōu)勢(shì)在于高通量檢測(cè)、微量樣品需求、快速輸出結(jié)果與智能數(shù)據(jù)處理。它不僅適用于分子生物學(xué)與蛋白質(zhì)研究，也在臨床醫(yī)學(xué)、藥物研發(fā)和環(huán)境監(jiān)測(cè)中展現(xiàn)出廣闊應(yīng)用前景。