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賽默飛分光光度計 BioMate 160 是一款高性能紫外-可見光分光光度計，廣泛應用于生命科學、藥學、環(huán)境監(jiān)測、食品分析以及教學實驗。該儀器能夠在 190–1100 nm 波長范圍內進行精確測量，支持單波長、多波長、掃描、動力學和定量分析等多種模式。雖然設備本身功能完善，但實驗結果的準確性和穩(wěn)定性，取決于使用者是否掌握科學的操作技巧。本文將從多個角度系統(tǒng)總結 BioMate 160 的使用技巧，以幫助實驗人員獲得最佳實驗數據。
預熱：氘燈和鎢燈均需預熱 10–15 分鐘，以穩(wěn)定光強。
合理切換：紫外區(qū)（190–350 nm）使用氘燈，可見光區(qū)（350–1100 nm）使用鎢燈。
減少開關：避免頻繁開關光源，以延長燈泡壽命。
針對性選擇：核酸測定用 260 nm，蛋白質可用 280 nm 或染料法 595 nm。
光譜掃描：在不確定檢測峰值時，應先進行全光譜掃描，選擇特征吸收峰。
校準波長：定期進行校準，避免因儀器老化造成誤差。
材質匹配：紫外檢測用石英比色皿，可見光檢測用光學玻璃比色皿。
清潔度：比色皿外壁必須干凈，避免指紋和水滴影響光路。
方向一致：同一實驗中比色皿放置方向應一致，以保持光程相同。
輕拿輕放：避免劃傷光學面，劃痕會導致散射光干擾。
濃度控制：樣品吸光度應保持在 0.1–1.0 范圍，過高需稀釋。
避免氣泡：加樣時應輕緩操作，氣泡會干擾光路。
樣品穩(wěn)定性：對光敏性或易氧化的樣品，應避光或在短時間內完成測量。
每次實驗前必須進行空白校準。
校準液應與樣品溶劑完全一致，避免溶劑差異帶來系統(tǒng)誤差。
每個樣品至少測定三次，取平均值。
對動力學實驗，應設定連續(xù)采樣，避免人為間隔過大導致數據跳躍。
定量實驗必須繪制標準曲線，避免單點換算。
標準樣品濃度范圍應覆蓋未知樣品的預期濃度。
樣品中可能存在雜質干擾，應在相應波長進行背景扣除。
核酸檢測應同時監(jiān)測 A260、A280 和 A230，以排查污染。
實驗數據應及時導出并保存，避免因儀器重置而丟失。
對重要實驗，應保存完整光譜曲線，便于追溯。
濃度換算：A260 = 1.0 時，雙鏈 DNA 濃度約為 50 μg/mL，RNA 約為 40 μg/mL。
純度判斷：A260/A280 = 1.8–2.0 表示核酸純度較高。
雜質排查：A260/A230 偏低說明可能有鹽或酚類殘留。
紫外吸收法：適用于較純凈蛋白，但緩沖液中若含有吸收物質則不適合。
染料法：如考馬斯亮藍法（595 nm），靈敏度高，適合常規(guī)檢測。
一致性控制：建議同一實驗中使用同一品牌試劑，減少批次差異。
反應早期：應重點記錄反應初始線性階段，數據最具代表性。
采樣間隔：常設定 5–10 秒采樣一次，根據反應速度調整。
溫度條件：反應溫度需保持恒定，波動會顯著影響反應速率。
OD600 測定：用于細胞或細菌生長曲線繪制。
均勻性：測定前輕輕混勻，避免沉淀或團聚導致測量不準。
時間點一致：采樣間隔應固定，保證曲線可比性。
全波段掃描：藥物降解研究需記錄光譜隨時間的變化。
多波長測定：環(huán)境檢測樣品復雜，應在多個波長下檢測。
標準對照：與標準溶液比對，可提高可靠性。
氘燈壽命約 1000 小時，應記錄累計使用時間，及時更換。
鎢燈壽命較長，但也需定期檢測亮度。
建議一次實驗中保持光源常亮，避免頻繁開關。
每次實驗后清潔比色皿槽，防止殘液腐蝕。
光學窗口應使用無塵布清潔，避免使用粗糙紙巾。
長期不用時應加蓋防塵罩。
定期進行波長校準與光度校正。
若出現異常漂移，應及時聯(lián)系專業(yè)技術人員。
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