賽默飛培養(yǎng)箱371清潔流程

一、設(shè)備概述

賽默飛（Thermo Fisher Scientific）371型CO?培養(yǎng)箱是一款高精度細(xì)胞培養(yǎng)設(shè)備，廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)、醫(yī)學(xué)研究、藥物開(kāi)發(fā)及組織工程等領(lǐng)域。該設(shè)備通過(guò)恒溫、恒濕與穩(wěn)定的二氧化碳濃度，為細(xì)胞生長(zhǎng)提供接近生理狀態(tài)的環(huán)境。其設(shè)計(jì)結(jié)構(gòu)包括六面直熱加熱系統(tǒng)、自動(dòng)濕度調(diào)節(jié)系統(tǒng)、HEPA空氣過(guò)濾循環(huán)系統(tǒng)以及高溫干熱滅菌模塊。

由于培養(yǎng)箱常年處于高濕、高溫、富含營(yíng)養(yǎng)氣體的環(huán)境中，極易滋生細(xì)菌、真菌及霉菌孢子。若清潔不及時(shí)，污染將直接影響細(xì)胞培養(yǎng)結(jié)果，造成實(shí)驗(yàn)失敗或交叉污染。因此，制定并嚴(yán)格執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)化的清潔流程是保證實(shí)驗(yàn)可靠性的前提。

二、污染來(lái)源與清潔必要性

1. 污染來(lái)源分析

（1）空氣與操作環(huán)境污染：實(shí)驗(yàn)室空氣中存在微生物顆粒，開(kāi)門(mén)取放樣品時(shí)隨氣流進(jìn)入箱體內(nèi)部。
（2）培養(yǎng)液蒸發(fā)與泄漏：培養(yǎng)液或試劑滴落到腔體底部，形成富含營(yíng)養(yǎng)的污染源。
（3）操作人員攜帶污染：手套、器皿、培養(yǎng)皿等表面附著微生物，接觸腔體內(nèi)壁時(shí)可能傳播。
（4）濕度盤(pán)水體污染：若長(zhǎng)期不更換水或使用非滅菌水，微生物會(huì)在水盤(pán)內(nèi)大量繁殖。
（5）過(guò)濾系統(tǒng)老化：HEPA濾芯使用時(shí)間過(guò)長(zhǎng)會(huì)降低過(guò)濾效率，使污染物隨空氣循環(huán)進(jìn)入腔體。

2. 清潔的重要性

培養(yǎng)箱的清潔不僅關(guān)系到實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性，更直接影響細(xì)胞存活率和實(shí)驗(yàn)安全性。

• 定期清潔可防止霉菌孢子和細(xì)菌形成生物膜。

• 有助于保持CO?傳感器精度與氣體流通順暢。

• 延長(zhǎng)設(shè)備使用壽命，避免內(nèi)部部件腐蝕。

• 確保高溫滅菌功能的有效執(zhí)行。

三、清潔與滅菌原則

在正式清潔前，需明確以下四項(xiàng)基本原則：

1. 先斷電后操作：清潔前務(wù)必關(guān)閉電源、氣源并拔掉插頭，防止電擊與元件損壞。

2. 先外后內(nèi)、先上后下：清潔順序從外部表面到內(nèi)部腔體，從頂部至底部，避免污水回流污染。

3. 區(qū)分干濕清潔階段：先進(jìn)行干式清理以去除固體殘留，再進(jìn)行濕擦與化學(xué)消毒。

4. 禁止使用強(qiáng)酸強(qiáng)堿：所有清潔劑應(yīng)為中性或弱堿性，以防腐蝕不銹鋼內(nèi)腔與傳感器。

四、標(biāo)準(zhǔn)清潔流程

（一）準(zhǔn)備階段

1. 停機(jī)與冷卻

• 關(guān)閉培養(yǎng)箱電源并切斷CO?氣源。

• 若設(shè)備近期使用過(guò)高溫滅菌功能，應(yīng)等待腔體自然降溫至室溫。

2. 移除內(nèi)部物品

• 取出所有培養(yǎng)皿、瓶、架及水盤(pán)，并記錄擺放順序。

• 將樣品轉(zhuǎn)移至備用培養(yǎng)箱或低溫保存裝置中。

3. 防護(hù)與清潔用品準(zhǔn)備

• 穿戴實(shí)驗(yàn)服、手套、口罩與防護(hù)眼鏡。

• 準(zhǔn)備無(wú)纖維布、無(wú)塵紙、噴瓶、70%乙醇或異丙醇、無(wú)離子水、滅菌蒸餾水。

• 若需深度清潔，可準(zhǔn)備低殘留中性洗滌劑溶液（稀釋濃度0.5–1%）。

（二）外部清潔

1. 機(jī)體外殼

• 用微濕的軟布蘸取中性清潔劑，沿同一方向擦拭外殼表面。

• 注意通風(fēng)口及接縫處的灰塵積聚，可使用軟毛刷輕輕清理。

• 避免清潔液流入控制面板或通電接口。

2. 控制面板與顯示屏

• 使用70%乙醇輕拭表面，不可直接噴灑。

• 檢查按鍵靈敏度及顯示狀態(tài)，確認(rèn)無(wú)殘留液體。

（三）內(nèi)部腔體清潔

1. 拆卸內(nèi)部部件

• 取出擱板、托架、導(dǎo)氣罩、水盤(pán)及傳感器保護(hù)罩。

• 按順序編號(hào)放置，便于清潔后復(fù)原。

2. 初步清除污染物

• 使用無(wú)塵布擦去腔體內(nèi)的水漬、培養(yǎng)液殘留或雜質(zhì)。

• 對(duì)積垢部位可用溫水浸泡后擦拭。

3. 中性洗滌劑清潔

• 將稀釋后的洗滌液噴灑在內(nèi)壁、角落及擱板上。

• 靜置3–5分鐘后用濕布反復(fù)擦凈，確保不留化學(xué)殘留。

4. 清水漂洗

• 用無(wú)離子水或滅菌水擦拭至少兩遍，徹底去除殘留清潔劑。

• 確保每次擦拭布為干凈狀態(tài)，避免交叉污染。

5. 酒精消毒

• 使用70%乙醇或異丙醇擦拭整個(gè)內(nèi)壁及配件。

• 重點(diǎn)處理門(mén)密封條、轉(zhuǎn)角、風(fēng)道入口及CO?噴嘴。

• 靜置自然風(fēng)干，不使用加熱烘干方式，以免殘留酒精蒸汽引燃。

（四）濕度盤(pán)與水路系統(tǒng)清潔

1. 清洗水盤(pán)

• 倒掉殘余水，使用中性洗滌液清洗表面后沖凈。

• 用乙醇再次擦拭，并以滅菌水漂洗干凈。

2. 水質(zhì)管理

• 推薦使用滅菌蒸餾水或高純?nèi)ルx子水，不得使用自來(lái)水。

• 每周更換一次水，防止微生物滋生。

3. 檢查蒸發(fā)表面

• 確認(rèn)水盤(pán)底部無(wú)沉淀、無(wú)粘附污染物。

• 若發(fā)現(xiàn)銹斑或白色水垢，可使用檸檬酸溶液輕微擦拭，再以清水漂凈。

（五）HEPA過(guò)濾與通風(fēng)系統(tǒng)維護(hù)

1. 檢查過(guò)濾器狀態(tài)

• 若設(shè)備帶有HEPA循環(huán)模塊，需觀察濾芯是否積塵或變色。

• 一般建議每6個(gè)月至1年更換一次。

2. 風(fēng)道清潔

• 關(guān)閉風(fēng)機(jī)后，用無(wú)塵布擦拭風(fēng)口區(qū)域。

• 禁止用強(qiáng)力氣流吹掃，以免損傷風(fēng)機(jī)軸承。

3. 重裝前確認(rèn)

• 濾網(wǎng)干燥后重新安裝，確保密封圈完好。

• 檢查風(fēng)機(jī)運(yùn)轉(zhuǎn)聲音是否平穩(wěn)。

（六）門(mén)體與密封結(jié)構(gòu)清潔

1. 內(nèi)外門(mén)玻璃

• 使用無(wú)纖維布和酒精輕擦，不可使用含氨清潔劑。

• 清潔后用干布擦干防止水印殘留。

2. 密封圈

• 取下硅膠門(mén)封條，用溫水及中性洗劑清洗，徹底擦干。

• 檢查密封圈是否有破損或老化，必要時(shí)更換。

3. 門(mén)內(nèi)加熱裝置檢查

• 確保加熱線未被液體浸濕。若有水漬，需完全干燥后再通電。

（七）傳感器與氣體接口維護(hù)

1. CO?傳感器

• 若為熱導(dǎo)型傳感器，禁止使用液體清潔，應(yīng)使用干凈棉簽輕拭表面灰塵。

• 每半年進(jìn)行一次校準(zhǔn)，以保證測(cè)量精度。

2. 氣體接口

• 檢查進(jìn)氣口是否有雜質(zhì)或水汽。

• 用干燥空氣吹凈接口，確認(rèn)密封圈完好無(wú)裂紋。

3. 管路檢查

• 若CO?供氣管出現(xiàn)水汽回流，應(yīng)立即斷開(kāi)并更換干燥過(guò)濾器。

（八）內(nèi)部滅菌與烘干階段

1. 自然干燥

• 清潔完畢后保持門(mén)開(kāi)啟狀態(tài)，待內(nèi)部完全干燥。

• 不可使用外部加熱源或吹風(fēng)機(jī)。

2. 執(zhí)行高溫滅菌程序

• 關(guān)閉門(mén)體，開(kāi)啟Steri-Cycle高溫滅菌模式。

• 滅菌溫度140℃，持續(xù)時(shí)間約14小時(shí)。

• 滅菌結(jié)束后自動(dòng)冷卻，直至腔體溫度恢復(fù)常溫。

3. 滅菌驗(yàn)證

• 檢查控制面板確認(rèn)滅菌流程完成且無(wú)報(bào)警信息。

• 若有溫度異?；虺绦蛑袛啵瑧?yīng)重新運(yùn)行滅菌程序。

（九）復(fù)原與運(yùn)行驗(yàn)證

1. 組件復(fù)裝

• 按清潔前編號(hào)順序裝回?cái)R板、托架、風(fēng)道罩與水盤(pán)。

• 確認(rèn)所有部件牢固、平整。

2. 電氣與氣源連接

• 插入電源插頭并開(kāi)啟總電源。

• 重新連接CO?氣瓶，檢查壓力表是否穩(wěn)定。

3. 功能測(cè)試

• 設(shè)定溫度37℃、CO?濃度5%，運(yùn)行24小時(shí)。

• 觀察溫度、濕度及氣體濃度穩(wěn)定性。

• 若數(shù)據(jù)恢復(fù)正常且無(wú)報(bào)警，說(shuō)明清潔與滅菌效果良好。

五、定期維護(hù)與周期安排

通過(guò)科學(xué)的周期管理，能有效防止生物膜形成和氣體傳感器漂移，保持培養(yǎng)環(huán)境長(zhǎng)期穩(wěn)定。

六、注意事項(xiàng)與安全要求

1. 清潔過(guò)程中避免金屬刷、粗糙海綿等硬質(zhì)工具，以防刮傷不銹鋼腔體。

2. 清潔劑不得含氯或氨成分，避免腐蝕及殘留氣味。

3. 若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)液泄漏到電加熱元件周?chē)?，?yīng)立即斷電并聯(lián)系專(zhuān)業(yè)人員檢修。

4. 滅菌程序運(yùn)行時(shí)嚴(yán)禁開(kāi)啟箱門(mén)或斷電，以免造成系統(tǒng)異常。

5. 所有清潔布、棉簽和手套均應(yīng)為一次性使用，防止交叉污染。

6. 清潔結(jié)束后應(yīng)記錄清潔日期、操作人及檢查人，建立可追溯檔案。

七、常見(jiàn)問(wèn)題與解決方法

八、長(zhǎng)期保養(yǎng)建議

1. 建立清潔檔案
   對(duì)每次清潔、滅菌及維護(hù)記錄日期、操作人、使用清潔劑類(lèi)型、耗時(shí)及檢測(cè)結(jié)果，形成完整檔案以供追蹤。

2. 環(huán)境控制
   保證實(shí)驗(yàn)室空氣潔凈度，避免灰塵及微生物過(guò)度進(jìn)入?？諝膺^(guò)濾系統(tǒng)應(yīng)定期維護(hù)。

3. 合理使用設(shè)備
   避免長(zhǎng)期滿(mǎn)負(fù)荷運(yùn)行，培養(yǎng)皿間保持通風(fēng)間距。

4. 定期培訓(xùn)人員
   操作人員應(yīng)熟悉清潔流程及安全守則，掌握應(yīng)急處理方法。

5. 專(zhuān)業(yè)檢修與年度保養(yǎng)
   每年至少進(jìn)行一次由專(zhuān)業(yè)工程師執(zhí)行的全面維護(hù)，包括電氣系統(tǒng)、加熱元件、傳感器、過(guò)濾裝置的檢測(cè)與更換。

九、清潔后的驗(yàn)證與環(huán)境檢測(cè)

在完成清潔與滅菌操作后，為確保設(shè)備內(nèi)環(huán)境符合生物培養(yǎng)要求，應(yīng)進(jìn)行以下驗(yàn)證步驟：

1. 微生物檢測(cè)
   使用培養(yǎng)皿暴露法或拭子采樣，對(duì)腔體內(nèi)壁及水盤(pán)區(qū)域進(jìn)行檢測(cè)。若菌落數(shù)為零，說(shuō)明滅菌徹底。

2. 空氣潔凈度檢測(cè)
   開(kāi)啟循環(huán)風(fēng)機(jī)后使用塵埃粒子計(jì)數(shù)儀檢測(cè)空氣潔凈度，應(yīng)符合ISO 5級(jí)標(biāo)準(zhǔn)。

3. 溫濕度穩(wěn)定性測(cè)試
   連續(xù)記錄24小時(shí)內(nèi)溫濕度波動(dòng)，應(yīng)分別控制在±0.3℃和±3%RH以?xún)?nèi)。

4. 氣體濃度穩(wěn)定性
   測(cè)試CO?濃度恢復(fù)速度，應(yīng)在15分鐘內(nèi)恢復(fù)至設(shè)定值并保持穩(wěn)定。

若上述指標(biāo)均達(dá)標(biāo)，即可正式投入實(shí)驗(yàn)使用。

十、結(jié)語(yǔ)

賽默飛371型CO?培養(yǎng)箱作為高精度生物培養(yǎng)設(shè)備，其清潔流程不僅是維護(hù)設(shè)備性能的必要環(huán)節(jié)，更是實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制的重要組成部分。規(guī)范的清潔流程能有效防止交叉污染，延長(zhǎng)設(shè)備壽命，保障細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境的穩(wěn)定性。

通過(guò)建立科學(xué)的周期性維護(hù)制度、嚴(yán)格執(zhí)行操作標(biāo)準(zhǔn)、強(qiáng)化人員培訓(xùn)與記錄管理，可將污染風(fēng)險(xiǎn)降至最低。只有在“清潔、滅菌、維護(hù)”三環(huán)合一的體系下，才能充分發(fā)揮371培養(yǎng)箱的高性能優(yōu)勢(shì)，為科研工作提供長(zhǎng)期穩(wěn)定的支持。