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質(zhì)保3年只換不修，廠家長沙實(shí)了個(gè)驗(yàn)儀器制造有限公司

一、概述

伯樂電穿孔儀 165-2660 是一款集高精度控制、模塊化結(jié)構(gòu)與安全保護(hù)于一體的電穿孔系統(tǒng)。該設(shè)備通過瞬間高壓脈沖作用于細(xì)胞，使細(xì)胞膜形成可逆性微孔，從而實(shí)現(xiàn)外源 DNA、RNA、蛋白質(zhì)等大分子的導(dǎo)入。

儀器設(shè)計(jì)適用于多種實(shí)驗(yàn)體系，包括細(xì)菌、酵母、植物原生質(zhì)體及哺乳動物細(xì)胞。其核心優(yōu)勢在于輸出波形穩(wěn)定、電壓控制精準(zhǔn)、操作簡便且重復(fù)性高。為了保證實(shí)驗(yàn)成功率，操作者需熟悉設(shè)備結(jié)構(gòu)與標(biāo)準(zhǔn)操作流程，并嚴(yán)格遵守安全規(guī)范。

二、儀器認(rèn)識與組成

在使用前，操作者應(yīng)了解電穿孔儀的基本結(jié)構(gòu)與功能。伯樂 165-2660 系統(tǒng)主要由以下部分構(gòu)成：

1. 主控單元（Main Unit）

• 負(fù)責(zé)電能轉(zhuǎn)換與輸出控制，是儀器的核心部分。

• 內(nèi)含微處理控制系統(tǒng)，可精確設(shè)定電壓、電容、電阻及脈沖時(shí)間。

2. ShockPod 電擊槽

• 放置電擊杯的部分，負(fù)責(zé)將高壓脈沖傳遞給樣品。

• 內(nèi)置安全閉鎖開關(guān)，蓋未合上時(shí)無法啟動放電。

3. CE 模塊（電容擴(kuò)展模塊）

• 用于擴(kuò)展電容容量，調(diào)節(jié)時(shí)間常數(shù)與能量釋放速度，常用于指數(shù)衰減波模式。

4. PC 模塊（脈沖控制模塊）

• 調(diào)節(jié)輸出波形、電阻與脈沖時(shí)間，用于方波模式或多脈沖操作。

5. 顯示與控制界面

• 前面板配有 LCD 顯示屏、功能按鍵與指示燈，用于參數(shù)設(shè)定和狀態(tài)監(jiān)控。

6. 電擊杯與連接線

• 電擊杯有 0.1 cm、0.2 cm、0.4 cm 三種規(guī)格，對應(yīng)不同細(xì)胞類型與體積。

• 高壓連接線負(fù)責(zé)將能量安全傳遞至電擊槽。

三、實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備

1. 實(shí)驗(yàn)環(huán)境

• 實(shí)驗(yàn)臺平穩(wěn)、干燥，保持整潔，遠(yuǎn)離高濕和易燃物。

• 環(huán)境溫度控制在 20–25 ℃，濕度不超過 80%。

• 確保實(shí)驗(yàn)臺接地良好，電源電壓穩(wěn)定在 220 V ±10%。

2. 電源與接地檢查

• 插座必須帶有獨(dú)立地線，且接觸可靠。

• 不得使用延長線或共用插座，以免電壓波動。

• 儀器背面接地端應(yīng)接入實(shí)驗(yàn)室防靜電系統(tǒng)。

3. 儀器檢查

1. 檢查主機(jī)、電擊槽及模塊外觀是否完好。

2. 確認(rèn)電擊杯干凈、無裂紋、無導(dǎo)電殘留。

3. 檢查風(fēng)扇與散熱孔是否暢通。

4. 插好電源線與連接線，確保接頭牢固。

5. 通電后進(jìn)行自檢，屏幕顯示“READY”方可進(jìn)入設(shè)置。

4. 樣品準(zhǔn)備

• 細(xì)胞狀態(tài)：處于對數(shù)生長期，活性高，無污染。

• 緩沖液：使用低離子強(qiáng)度專用電穿孔緩沖液。

• 核酸溶液：DNA、RNA 或質(zhì)粒溶液濃度適中，純度高。

• 混合比例：一般為樣品 9 份 + 質(zhì)粒 1 份，混合后輕輕顛倒均勻。

• 避免氣泡：加入電擊杯后輕敲杯壁，使氣泡完全上浮。

四、設(shè)備安裝步驟

1. 將主控單元放在平穩(wěn)臺面上，保證四腳平衡。

2. 將 ShockPod 電擊槽通過專用線纜連接至主機(jī)前端接口。

3. 若需使用 CE 或 PC 模塊，在斷電狀態(tài)下插入后背接口。

4. 插入電源線并接通地線。

5. 打開電源開關(guān)，系統(tǒng)自檢通過后即可使用。

注意：模塊插拔必須在斷電狀態(tài)下進(jìn)行，切勿在通電時(shí)操作。

五、操作流程

1. 啟動與模式選擇

開機(jī)后進(jìn)入主菜單，可選擇以下三種模式：

• 預(yù)設(shè)模式（Preset Protocol）：內(nèi)置不同細(xì)胞類型的標(biāo)準(zhǔn)參數(shù)，適合新手使用。

• 手動模式（Manual Mode）：可自定義電壓、電容、電阻及脈沖時(shí)間。

• 用戶模式（User Protocol）：保存自定義程序以便重復(fù)使用。

使用方向鍵選擇模式后按“ENTER”確認(rèn)進(jìn)入。

2. 參數(shù)設(shè)置

（1）波形選擇

• 選擇“指數(shù)衰減波”或“方波”。

• 指數(shù)衰減波常用于細(xì)菌、酵母；方波適合哺乳動物細(xì)胞。

（2）電壓設(shè)置

• 使用上下鍵調(diào)整電壓值。

• 電壓范圍 10–3000 V，可按細(xì)胞類型選擇。

（3）電容與電阻設(shè)置

• 使用 CE 模塊可在 25–3275 μF 范圍調(diào)節(jié)。

• PC 模塊可設(shè)定電阻 50–1000 Ω 或選擇 ∞ 模式。

• 根據(jù)實(shí)驗(yàn)類型靈活調(diào)節(jié)以控制能量釋放速率。

（4）脈沖時(shí)間與次數(shù)

• 方波模式需設(shè)定持續(xù)時(shí)間（0.05–10 ms）和脈沖次數(shù)（1–10 次）。

• 多脈沖模式下，間隔一般設(shè)定為 3–5 秒。

3. 裝樣與放電

1. 將樣品加入電擊杯中，體積不超過容積的 80%。

2. 檢查液面平整無氣泡。

3. 打開 ShockPod 上蓋，放入電擊杯并對準(zhǔn)電極。

4. 蓋上安全蓋后，屏幕顯示“Cuvette Ready”。

5. 按下“PULSE”鍵開始充電，待顯示“READY TO PULSE”后執(zhí)行放電。

6. 放電結(jié)束后，顯示屏顯示放電曲線及參數(shù)值。

7. 等待約 5 秒，確認(rèn)完全放電后取出電擊杯。

注意：放電過程中嚴(yán)禁觸碰儀器及電擊槽，防止高壓觸電。

4. 樣品回收與處理

1. 迅速將電擊后的樣品加入預(yù)溫培養(yǎng)基中恢復(fù)。

2. 對于細(xì)菌或酵母，恢復(fù)時(shí)間為 30 分鐘左右；哺乳動物細(xì)胞需 1–2 小時(shí)。

3. 樣品恢復(fù)后可進(jìn)行篩選、擴(kuò)增或下游檢測。

4. 電擊杯使用后用去離子水清洗干凈并晾干備用。

六、常用操作技巧

1. 電擊前可將電擊杯及樣品短暫預(yù)冷，減少電弧發(fā)生率。

2. 使用低鹽緩沖液能顯著提升穿孔成功率。

3. 初次使用某細(xì)胞類型時(shí)應(yīng)進(jìn)行電壓梯度測試，以確定最優(yōu)參數(shù)。

4. 細(xì)胞密度和 DNA 濃度對轉(zhuǎn)化率影響顯著，建議記錄每次實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以便優(yōu)化。

5. 多脈沖模式可提高轉(zhuǎn)染效率，但會降低細(xì)胞存活率，應(yīng)平衡選擇。

七、安全操作要點(diǎn)

1. 實(shí)驗(yàn)前確認(rèn)電源開關(guān)處于關(guān)閉狀態(tài)后再連接線纜。

2. 操作者需佩戴絕緣手套與防護(hù)眼鏡。

3. 實(shí)驗(yàn)臺面保持干燥，禁止液體接觸主機(jī)與接口。

4. 放電時(shí)人員需站在儀器側(cè)方，避免正面對高壓區(qū)。

5. 電弧閃光、異味或異常聲音出現(xiàn)時(shí)立即停止操作并切斷電源。

6. 嚴(yán)禁在開機(jī)狀態(tài)下插拔模塊或打開電擊槽。

7. 長時(shí)間連續(xù)工作后需停機(jī) 10 分鐘降溫。

八、結(jié)束操作

1. 實(shí)驗(yàn)完成后，關(guān)閉主機(jī)電源，等待內(nèi)部電容完全放電。

2. 拔下電源線與模塊連接線。

3. 用干布擦拭儀器表面，保持清潔。

4. 將電擊槽與電擊杯分開晾干。

5. 覆蓋防塵罩，將設(shè)備置于干燥通風(fēng)處保存。

九、數(shù)據(jù)管理與程序存儲

• 系統(tǒng)可自動保存最近一次實(shí)驗(yàn)參數(shù)。

• 用戶可手動命名并存儲最多 50 組實(shí)驗(yàn)程序。

• 通過 USB 接口可將實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)導(dǎo)出至電腦進(jìn)行記錄與分析。

• 刪除舊程序時(shí)請確認(rèn)已備份，以免數(shù)據(jù)丟失。

十、維護(hù)與校準(zhǔn)

1. 每周檢查主機(jī)和模塊接口是否松動。

2. 每月清理風(fēng)扇與散熱口，防止灰塵堵塞。

3. 每半年進(jìn)行一次輸出電壓校準(zhǔn)，確保精度。

4. 定期檢查高壓線是否老化或有破損。

5. 若設(shè)備長時(shí)間閑置，每月通電運(yùn)行 5 分鐘以維持電容性能。

十一、常見問題與排查

十二、實(shí)驗(yàn)安全管理與責(zé)任制度

1. 設(shè)備僅限經(jīng)過培訓(xùn)的實(shí)驗(yàn)人員使用。

2. 每次實(shí)驗(yàn)前應(yīng)由操作人填寫使用登記。

3. 若設(shè)備出現(xiàn)異常，須立即報(bào)告管理員并暫停使用。

4. 實(shí)驗(yàn)室應(yīng)設(shè)專人負(fù)責(zé)儀器維護(hù)與定期校準(zhǔn)。

5. 所有安全警示標(biāo)簽必須保持清晰可見。

6. 嚴(yán)禁私自拆開主機(jī)或更換內(nèi)部零件。

十三、性能優(yōu)化與應(yīng)用建議

1. 針對細(xì)菌實(shí)驗(yàn)

• 電壓較高、脈沖短；常用指數(shù)衰減波。

• 使用 0.2 cm 電擊杯，體積約 0.2 mL。

2. 針對酵母實(shí)驗(yàn)

• 需去除細(xì)胞壁或使用特殊緩沖液以提升導(dǎo)入率。

• 可使用方波模式，時(shí)間適度延長。

3. 針對哺乳動物細(xì)胞

• 電壓較低，脈沖時(shí)間長；適合方波多脈沖模式。

• 加入恢復(fù)液可提高細(xì)胞存活率。

4. 針對植物原生質(zhì)體

• 樣品粘度大，應(yīng)使用大間隙電擊杯并降低電壓。

• 適當(dāng)延長放電時(shí)間。

十四、常規(guī)保養(yǎng)與質(zhì)保政策

伯樂電穿孔儀 165-2660 出廠前均經(jīng)過嚴(yán)格檢測，整機(jī)質(zhì)保三年，實(shí)行只換不修政策。為保持性能穩(wěn)定，應(yīng)遵守以下保養(yǎng)要求：

• 定期檢查接地線與保險(xiǎn)絲。

• 使用原廠電擊杯及附件，避免不兼容問題。

• 每次實(shí)驗(yàn)結(jié)束后清理殘留液體并覆蓋防塵罩。

• 不得將設(shè)備暴露于潮濕或高溫環(huán)境。

• 存放環(huán)境溫度 –10 至 55 ℃，濕度 ≤ 90%。