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質保3年只換不修，廠家長沙實了個驗儀器制造有限公司

一、儀器簡介

伯樂電穿孔儀 165-2660 是一款高性能的生物電轉化設備，專為基因導入、細胞融合及分子遞送實驗設計。
其原理是通過高壓脈沖使細胞膜瞬時形成可逆性微孔，外源 DNA、RNA 或蛋白分子即可進入細胞內部，從而實現(xiàn)轉化或轉染。

該設備具有高電壓精度、波形穩(wěn)定、操作簡便和安全保護完善的特點，適用于細菌、酵母、真核細胞及植物原生質體的分子生物學研究。

二、技術參數(shù)

三、結構組成

伯樂電穿孔儀 165-2660 采用模塊化設計，結構清晰，便于維護和擴展。

1. 主機部分

包括高壓發(fā)生器、電容組、放電控制模塊、電源系統(tǒng)和微處理器控制單元，是整個儀器的核心。

2. ShockPod 電擊槽

用于容納電擊杯并完成高壓放電過程，內置電極接觸端與蓋鎖安全檢測裝置。

3. 模塊系統(tǒng)

可根據(jù)實驗類型選擇 CE 模塊（電容擴展）或 PC 模塊（方波控制），實現(xiàn)多種電擊模式。

4. 操作面板

包括 LCD 顯示屏、方向鍵、功能鍵（MENU、ENTER、SAVE、PULSE）等，用于參數(shù)設置與數(shù)據(jù)讀取。

5. 安全系統(tǒng)

內置多重安全機制：蓋鎖檢測、過壓保護、過溫報警、自動放電及電弧防護。

四、原理簡述

當電場強度達到細胞膜擊穿閾值時，膜兩側電位差導致脂質雙層重排，形成可逆微孔。外源分子在電場作用下進入細胞，隨后細胞膜自我修復。

關鍵參數(shù)：

• 電壓與電場強度決定穿孔效果；

• 電容決定能量釋放速度；

• 電阻與時間常數(shù)決定放電波形；

• 波形類型影響細胞響應特性。

科學控制這些參數(shù)即可實現(xiàn)高效、穩(wěn)定的電穿孔實驗。

五、使用環(huán)境要求

• 溫度：20–25℃；

• 濕度：30–60%；

• 工作臺需平整、防震、干燥；

• 電源穩(wěn)定且接地良好（接地電阻 ≤ 1 Ω）；

• 環(huán)境無腐蝕性氣體、強磁場及水汽；

• 不可與高功率設備共線使用。

六、開機與初始化

1. 確認電源線和接地線連接牢固；

2. 檢查 ShockPod 內部干燥清潔；

3. 插入模塊（CE 或 PC），確認卡扣到位；

4. 打開電源開關，儀器自動執(zhí)行系統(tǒng)自檢；

5. 自檢通過后，顯示“READY”進入主界面。

若出現(xiàn)錯誤代碼，應根據(jù)提示排查（如蓋鎖未閉合、電壓異常、風扇停轉等）。

七、參數(shù)設置

儀器提供三種工作模式，操作人員可根據(jù)實驗需求靈活選擇。

1. 預設模式（Preset Protocol）

內置多種常用細胞類型的推薦參數(shù)。

• 進入主菜單 → 選擇“Preset Protocol”；

• 選擇目標細胞類型（如 E. coli、Yeast、CHO 等）；

• 系統(tǒng)自動載入?yún)?shù)。

2. 手動模式（Manual Setup）

用戶可自定義所有參數(shù)。

• 電壓：10–3000 V；

• 電容：25–3275 μF；

• 電阻：50–1000 Ω 或 ∞；

• 波形：方波 / 指數(shù)衰減波；

• 脈沖次數(shù)：1–10 次；

• 系統(tǒng)自動顯示時間常數(shù)。

3. 用戶程序模式（User Program）

保存常用實驗方案，最多可存儲 99 組參數(shù)。
路徑：MENU → User Program → Save/Load。

八、運行方法

1. 樣品準備

1. 使用健康、活性良好的對數(shù)生長期細胞；

2. 洗滌細胞以去除高鹽培養(yǎng)基；

3. 使用低鹽緩沖液（如無離子 PBS）；

4. 重懸濃度：

• 細菌：1×10? cells/mL；

• 酵母：1×10? cells/mL；

• 哺乳動物細胞：1×10?–1×10? cells/mL；

5. 加入 DNA/RNA 溶液并輕輕混勻；

6. 將樣品與電擊杯一同在冰上預冷 5 分鐘。

2. 加樣與裝杯

• 將約 80% 容積樣品加入電擊杯；

• 輕敲杯壁排除氣泡；

• 放入 ShockPod 內槽，確認電極接觸良好；

• 關閉上蓋，聽到“咔噠”聲即表示鎖定。

3. 放電操作

1. 按 “PULSE” 鍵啟動充電；

2. 顯示屏提示 “CHARGING…”；

3. 當提示 “READY TO PULSE” 時按 “ENTER”；

4. 放電完成后屏幕顯示電壓、時間常數(shù)和能量釋放值；

5. 放電結束后等待“COMPLETE”提示再開蓋。

4. 樣品恢復

放電后立即將樣品轉移至恢復培養(yǎng)基中，按實驗類型培養(yǎng)：

• 細菌：37℃，30 分鐘；

• 酵母：30℃，60 分鐘；

• 哺乳動物細胞：37℃，1–2 小時。

九、安全操作規(guī)范

1. 放電前必須確保蓋鎖閉合；

2. 實驗時不得接觸 ShockPod、電擊杯或連接線；

3. 禁止使用含鹽或高導電緩沖液；

4. 每次放電間隔至少 10 秒；

5. 若出現(xiàn)電弧或異味，應立即斷電；

6. 使用穩(wěn)壓電源，避免電壓波動；

7. 嚴禁私自拆解或改裝儀器；

8. 放電時人員應遠離金屬器具；

9. 保持 ShockPod 干燥，防止漏電；

10. 電源線、保險絲應由專業(yè)人員更換。

十、數(shù)據(jù)記錄與導出

1. 自動記錄

每次實驗后系統(tǒng)自動保存：

• 放電電壓（Vout）；

• 時間常數(shù)（τ）；

• 電阻（Ω）；

• 能量釋放比例（%Energy）；

• 日期與編號。

2. 導出方法

• 插入 USB 存儲設備；

• 進入菜單“Data Export”；

• 選擇格式（CSV 或 TXT）；

• 文件自動生成，可導入電腦分析。

十一、常見問題及排除

十二、日常維護與保養(yǎng)

1. 每次使用后

• 關閉電源并拔下插頭；

• 用無水乙醇擦拭外殼和操作面板；

• 清潔 ShockPod 內槽并晾干；

• 電擊杯沖洗干凈后放回包裝盒。

2. 每周檢查

• 檢查電源線、風扇、接地線；

• 清理通風口灰塵；

• 檢查電極表面有無氧化。

3. 每月維護

• 測試電壓輸出精度；

• 校正時間常數(shù)；

• 檢查模塊插口是否松動。

4. 每年維護

• 由專業(yè)技術人員進行高壓系統(tǒng)檢測與軟件升級；

• 更換風扇濾網(wǎng)與老化部件。

十三、存放與運輸

• 存放環(huán)境溫度 10–30℃，濕度 30–60%；

• 環(huán)境干燥通風，遠離腐蝕性化學品；

• 不可堆放重物在設備上方；

• 長期停用時覆蓋防塵罩；

• 每月通電運行 5 分鐘保持系統(tǒng)活性；

• 運輸時使用原包裝箱并保持水平。

十四、實驗優(yōu)化建議

1. 電壓控制：電壓過低轉化率低，過高則細胞死亡，應逐級優(yōu)化；

2. 電容選擇：大電容延長能量釋放時間，有利于真核細胞轉化；

3. 波形調整：細菌適用指數(shù)衰減波，真核細胞適用方波；

4. 預冷操作：樣品與電擊杯預冷 4℃ 提高存活率；

5. 多脈沖策略：真核細胞使用 2–3 次低電壓脈沖可提升導入率；

6. 恢復時間：電擊后及時轉入培養(yǎng)基，有助于細胞修復。

十五、性能驗證與校準

為保證設備長期準確運行，應定期執(zhí)行以下校驗：

每半年應進行一次完整校準，并保存校準報告。

十六、安全警示

• 儀器屬高壓設備，嚴禁私自拆卸；

• 放電后需等待 5 秒再取出樣品；

• 操作時禁止飲食及攜帶液體；

• 不得在潮濕環(huán)境下開機；

• 發(fā)現(xiàn)異味或異常聲響應立即斷電；

• 嚴禁非專業(yè)人員維修。

十七、附錄：操作流程簡要

1. 檢查設備與樣品準備；

2. 開機并完成系統(tǒng)自檢；

3. 選擇模式與設置參數(shù)；

4. 加樣并放入 ShockPod；

5. 蓋緊上蓋并確認鎖定；

6. 執(zhí)行放電（PULSE）；

7. 記錄電壓與時間常數(shù)；

8. 轉移樣品恢復培養(yǎng)；

9. 清潔儀器與電擊杯；

10. 關閉電源、導出數(shù)據(jù)。