一、概述與定位
在生物學(xué)、細胞工程、組織工程、腫瘤研究、干細胞研究、藥物篩選、共培養(yǎng)模型、微生態(tài)研究等領(lǐng)域,科研人員往往需要在體外建立接近體內(nèi)(in vivo)的環(huán)境,以更真實地還原細胞/組織在體內(nèi)所處的溫度、濕度、氣體濃度(如 CO?、O? / 氮氣分壓)等條件。這樣的“環(huán)境模擬”有助于提高實驗的生理相關(guān)性與可重復(fù)性。
Heracell 240i 是 Thermo Fisher 旗下的高端 CO? / 三氣體培養(yǎng)箱型號之一(容量約 240 L),具有較完善的環(huán)境控制能力、較快恢復(fù)速度與較好的抗污染設(shè)計,是許多核心實驗室與高要求研究場景中常選設(shè)備。
在“模擬實驗環(huán)境”的語境下,它的價值主要體現(xiàn)在以下方面:
能夠精確、穩(wěn)定地控制溫度、濕度、CO? 濃度(以及可選的 O? 濃度);
在遭受擾動(如開門、操作、樣本添加)后具備快速恢復(fù)能力;
支持周期性或動態(tài)環(huán)境調(diào)整(如溫度梯度、氧濃度變化等);
具備內(nèi)部滅菌與抗污染措施,便于長期運行與多人使用。
以下內(nèi)容將從設(shè)備結(jié)構(gòu)與控制系統(tǒng)講起,逐步展開它在環(huán)境模擬中的能力,并指出在實際使用時應(yīng)注意的問題。
二、結(jié)構(gòu)組成與核心部件
要理解 Heracell 240i 在環(huán)境模擬中的性能,就必須先掌握其內(nèi)部結(jié)構(gòu)和關(guān)鍵子系統(tǒng)的設(shè)計思路。
1. 腔室結(jié)構(gòu)與材質(zhì)
Heracell 240i 提供兩種主要腔室材質(zhì)版本:電解拋光不銹鋼內(nèi)腔和純銅內(nèi)腔。前者易于清潔、耐腐蝕,后者則具備天然的抗菌/抗真菌特性,有利于抑制污染。
腔體整體采用光滑無死角設(shè)計,內(nèi)部邊角圓弧處理,減少積塵、減少清潔難度。支架、擱板、風(fēng)扇等組件均考慮易拆卸、便于維護。
可選配多個氣密內(nèi)門(如 6 門玻璃內(nèi)門結(jié)構(gòu)),允許用戶在僅打開局部區(qū)域而不干擾整個腔室環(huán)境的情況下操作樣本。
2. 溫度控制系統(tǒng)
直熱加熱方式:腔室壁或底部直接加熱,響應(yīng)速度快。
雙溫度探頭:通常配兩個溫度傳感器,其中一個用于主控制,另一個用于過溫監(jiān)測與冗余保護。
對流風(fēng)扇:腔室內(nèi)部裝有風(fēng)扇或混流裝置,使空氣在腔體中緩慢流動,以減小溫度分布差異。
溫控范圍:可在環(huán)境溫度 +3 °C 到約 55 °C 的范圍內(nèi)調(diào)節(jié)。
溫控精度:在正常使用狀態(tài)下溫度可控制至 ±0.1 °C(時變)級別,空間溫差通常在 ±0.5 °C 以內(nèi)。
3. 濕度控制系統(tǒng)
一體化水箱設(shè)計:該箱體采用集成水箱(無傳統(tǒng)開放水盤),通過加熱方式控制水蒸氣釋放,以維持較高相對濕度。
加熱底板 / 導(dǎo)熱結(jié)構(gòu):濕度水箱通過底板或加熱結(jié)構(gòu)與箱體熱源耦合,加快濕氣釋放速度。
水位傳感器:箱體內(nèi)設(shè)水位監(jiān)測器,一旦水位低于設(shè)定值,控制系統(tǒng)會在界面上提示補水。
快速濕度恢復(fù):與傳統(tǒng)水盤相比,該系統(tǒng)濕度恢復(fù)速度可提升數(shù)倍(開門后濕度迅速回升),適應(yīng)頻繁操作或使用低體積液體培養(yǎng)體系。
4. 氣體控制模塊(CO?、O? / 氮氣切換)
CO? 控制
可選用熱傳導(dǎo)(TC, thermal conductivity)式 CO? 傳感器或雙光束紅外(IR)式 CO? 傳感器。TC 傳感器在溫濕度穩(wěn)定條件下表現(xiàn)良好;IR 傳感器在濕度 / 溫度波動較強時穩(wěn)定性更好。
CO? 控制范圍通常是 0–20 %(或更寬),控制精度約 ±0.1 %。
傳感器支持在腔室內(nèi)原位使用,無需拆卸進行清潔或標定,即可參與設(shè)備的滅菌循環(huán)。O? / 三氣控制(可選配置)
在需要模擬低氧或高氧環(huán)境時,Heracell 240i 可配置 O? 控制模塊(例如控制范圍 1–21 % 或 5–90 %)。
O? 控制通常輔以氮氣 (N?) 混配,用于稀釋或調(diào)節(jié)氧濃度。
當(dāng)任一路氣體(CO?、O? / N?)氣源耗盡時,設(shè)備可通過內(nèi)置切換模塊自動切換到備用氣源(若提前接入備用管線)。
氣體通路設(shè)計包括氣密閥門、壓力補償口、安全閥、溢流通道等。
5. 控制系統(tǒng)與界面
iCAN 觸摸屏控制器:設(shè)備配備集成的觸摸屏界面,用戶可以直觀查看溫度、濕度、CO?、O? 等參數(shù)的實時數(shù)值與歷史趨勢曲線,設(shè)置參數(shù)、報警閾值、操作日志等。
報警與日志功能:系統(tǒng)具備聲光報警功能,在溫度異常、氣體異常、水位不足、超溫保護等情況下觸發(fā)警報。內(nèi)部記錄由設(shè)備啟動以來的環(huán)境趨勢、報警事件、操作記錄等,便于追蹤與驗證。
自動/手動校準功能:部分傳感器支持自動標定(auto-calibration),也可手動標定,以確保長期運行的精度穩(wěn)定性。
數(shù)據(jù)接口:通常提供 RS-232 或 USB 接口用于外部監(jiān)控、數(shù)據(jù)導(dǎo)出或與實驗室信息系統(tǒng)連接。
6. 污染控制與滅菌體系
ContraCon 濕熱滅菌:Heracell 240i 提供 90 °C 濕熱消毒循環(huán)(Moist heat)作為內(nèi)部滅菌程序,可殺滅細菌、霉菌、孢子、支原體等。該滅菌過程在腔體內(nèi)部進行,無需拆除傳感器或配件,便于常規(guī)維護。
抗污染設(shè)計:銅材質(zhì)內(nèi)壁版本具備天然的抗菌 / 抗真菌特性;光滑邊角、無螺絲暴露、少內(nèi)部通道等設(shè)計降低污染隱患。
分隔內(nèi)門 / 多門結(jié)構(gòu):通過劃分內(nèi)門區(qū)域,只開必要區(qū)域操作可減少整體環(huán)境擾動與交叉污染風(fēng)險。
易清潔性:箱體內(nèi)部結(jié)構(gòu)簡潔,易拆卸組件、便于定期擦拭或維持無菌環(huán)境。
三、環(huán)境模擬能力與優(yōu)勢
在“模擬實驗環(huán)境”的訴求下,Heracell 240i 具有以下幾個方面的性能優(yōu)勢,使其可以作為可靠的“模擬微環(huán)境設(shè)備”。
1. 穩(wěn)定、精細的溫度控制
要模擬體內(nèi)溫度、應(yīng)激溫度(如熱休克、低溫刺激等),溫度的穩(wěn)定性和響應(yīng)速度至關(guān)重要。240i 的直接加熱方式、對流風(fēng)扇循環(huán)和雙探頭設(shè)計,使得溫度升降、恢復(fù)迅速,且空間溫差較小,能夠保持樣本在一個較均勻的溫度場中。此外,當(dāng)設(shè)計溫度曲線(如溫度波動或周期性調(diào)整)時,該設(shè)備能夠執(zhí)行漸變或階梯控制。
2. 高濕度、快速恢復(fù)濕度環(huán)境
體內(nèi)細胞周圍幾乎處于水合環(huán)境,若培養(yǎng)箱濕度控制不佳,可能導(dǎo)致培養(yǎng)基蒸發(fā)、細胞脫水等問題。240i 的一體水箱設(shè)計在閉門狀態(tài)下能夠維持高相對濕度(例如在 37 °C 下可接近 ~90 % RH),并且在開門后能夠快速恢復(fù)濕度,減小對樣本的沖擊。這對那些對水分敏感、使用低體積培養(yǎng)液或氣體交換要求較高的體系尤為重要。
3. 精確的 CO? 濃度模擬
許多哺乳動物細胞培養(yǎng)體系基于 CO? / HCO?? 緩沖體系維持 pH。CO? 濃度波動會影響培養(yǎng)基 pH,從而影響細胞代謝、增殖、分化。240i 可在 0–20 % CO? 范圍內(nèi)精確控制濃度,并穩(wěn)定維持。使用適當(dāng)傳感器(TC 或 IR)能夠適應(yīng)不同濕度 / 溫度波動環(huán)境的控制需求。
4. 氧濃度 / 低氧環(huán)境模擬(可選)
在干細胞研究、腫瘤微環(huán)境研究、組織病理模型、再生醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域,低氧或高氧環(huán)境模擬往往非常重要。240i 的 O? 控制模塊可將氧濃度控制在 1–21 % 或 5–90 % 范圍內(nèi),從而支持低氧(hypoxia)或高氧(hyperoxia)研究。此外,通過與 CO? 控制協(xié)同,能夠?qū)崿F(xiàn)三氣體(O? / CO? / N?)共同控制,模擬更接近體內(nèi)的復(fù)雜氣體環(huán)境。
5. 快速恢復(fù)性能與擾動容忍度
在常規(guī)實驗操作(如加樣、取樣、換液、添加試劑等)中,開門操作不可避免。這類操作會使溫度、濕度、CO? / O? 水平短時偏離設(shè)定值。Heracell 240i 的設(shè)計(包括氣密內(nèi)門結(jié)構(gòu)、快速加熱/加濕系統(tǒng)、對流風(fēng)扇混合、氣體通路優(yōu)化)使得系統(tǒng)能夠較快恢復(fù)至設(shè)定條件。這樣就能將樣本暴露在不穩(wěn)定環(huán)境的時間壓縮,減少對實驗的負面影響。
6. 環(huán)境可編程 / 動態(tài)模擬能力
許多實驗設(shè)計要求模擬環(huán)境隨時間變化,例如晝夜節(jié)律溫度波動、氧濃度周期變化、應(yīng)激循環(huán)(如溫度或氧濃度快速上升 / 下降)等。利用 240i 的可編程控制系統(tǒng)與穩(wěn)定恢復(fù)能力,可以在一定程度上實現(xiàn)這種動態(tài)環(huán)境模擬,通過分段設(shè)定、曲線控制、時間編程等方式控制溫度、CO?、O? 隨時間變化。
7. 可追蹤性、監(jiān)控與數(shù)據(jù)記錄
對于高標準實驗(如要求可重復(fù)性、符合規(guī)范、追溯、審計等),設(shè)備內(nèi)置的日志功能、趨勢圖記錄、操作記錄、報警記錄等有助于回溯問題、驗證環(huán)境一致性。此外,通過外部接口(如 RS-232 或 USB),還可以實現(xiàn)遠程監(jiān)控或與實驗室管理系統(tǒng)整合。
8. 抗污染能力與整機滅菌
長期細胞培養(yǎng)極容易受到微生物污染、支原體污染等威脅。240i 的濕熱滅菌 (ContraCon) 循環(huán)、銅材質(zhì)腔體版本、分隔門設(shè)計和易清潔結(jié)構(gòu)共同構(gòu)成較完整的污染控制策略。通過定期執(zhí)行滅菌循環(huán),可以顯著降低污染風(fēng)險,保障長期環(huán)境穩(wěn)定性。
四、典型使用場景與模擬方案示范
下面列出若干典型的實驗情境,以及在這些情形下如何利用 240i 進行環(huán)境模擬與參數(shù)設(shè)計。
場景 A:常規(guī)哺乳動物細胞培養(yǎng)
目標環(huán)境:37 °C,5 % CO?,≈ 90 % 相對濕度
目的:提供穩(wěn)定、長期的細胞增殖 / 維持環(huán)境
方案要點:
設(shè)定溫度 37 °C,并啟動對流風(fēng)扇使腔體內(nèi)溫度均勻
設(shè) CO? 濃度為 5 %,選擇適合傳感器(如 TC)
保持水箱水位在安全范圍,確保濕度穩(wěn)定
定期(每周或每月)運行滅菌程序,減少潛在污染積累
放置樣本時避免遮擋空氣流通通道,合理分布
若有多個樣本操作需求,可配合分隔內(nèi)門以局部開門減少整體擾動
這種設(shè)置適合常見細胞系、轉(zhuǎn)染實驗、藥物處理、基因表達測定等日常細胞研究。
場景 B:低氧干細胞 / 腫瘤微環(huán)境模擬
目標環(huán)境:37 °C,5 % CO?,2–5 % O?, ≈ 90 % 濕度
目的:模擬體內(nèi)干細胞 niche 或腫瘤缺氧區(qū)域
方案要點:
在標準設(shè)定基礎(chǔ)上啟動 O? 控制模塊,將氧濃度調(diào)至設(shè)定水平
使用高穩(wěn)定性傳感器與自動校準功能,確保氧濃度長期穩(wěn)定
若實驗設(shè)計要求氧濃度波動(如再氧化階段),編程設(shè)定階段性變化
考慮操作擾動對氧濃度的影響,合理安排開門頻率
運行滅菌程序時,確保 O? 傳感器耐受濕熱循環(huán)
樣本布局應(yīng)保持充分氣體交換空間,避免因密集擺放造成局部氧耗影響
這種模擬適合研究干細胞分化、氧感受信號、腫瘤代謝適應(yīng)、再氧化應(yīng)激等。
場景 C:溫度應(yīng)激 / 熱休克 / 低溫刺激實驗
目標環(huán)境:設(shè)計如 37 °C → 42 °C / 25 °C 循環(huán),CO? 與濕度維持不變
目的:探究細胞在溫度波動下的應(yīng)激響應(yīng)、存活情況
方案要點:
設(shè)定多階段溫度程序(如 37 °C 2 小時 → 42 °C 30 分鐘 → 37 °C 恢復(fù)等)
確保溫度變化速率適中(非極端突變,以減小樣本損傷)
在整個程序中保持 CO? 和濕度穩(wěn)定,避免這些變量干擾溫度效應(yīng)
在實驗設(shè)計中合理安排樣本進出時間,以使擾動最小化
可通過重復(fù)循環(huán)模擬晝夜溫度波動或熱應(yīng)激恢復(fù)機制
此類方案適用于研究熱休克蛋白表達、溫度對細胞周期影響、耐熱性訓(xùn)練等。
場景 D:多因素聯(lián)合模擬(如低氧 + 溫度波動 + CO? 梯度)
目標環(huán)境:例如 37 °C / 5 % CO? / 3 % O?;設(shè)計一個時期內(nèi)短暫升溫至 40 °C 或短暫缺氧階段
目的:更接近生理/病理狀態(tài)模擬,觀察細胞在復(fù)雜刺激下的聯(lián)合響應(yīng)
方案要點:
設(shè)定基礎(chǔ)環(huán)境(溫度、CO?、O?)為穩(wěn)定狀態(tài)
編程設(shè)定短期擾動,例如在特定時間點溫度提升 2–3 °C 或暫時降低 O?
擾動結(jié)束后返回初始條件,觀察細胞恢復(fù)情況
在設(shè)計中注意擾動速率、持續(xù)時間、恢復(fù)期長度,以避免極端損傷
記錄環(huán)境趨勢曲線、報警記錄,確保數(shù)據(jù)可信性
這種模擬應(yīng)用于研究細胞對復(fù)合微環(huán)境應(yīng)激的適應(yīng)機制、代謝切換、信號通路響應(yīng)等。
五、優(yōu)劣勢與局限性
任何設(shè)備都有其適用范圍與局限性,下面就 Heracell 240i 在環(huán)境模擬用途中的優(yōu)、劣勢進行總結(jié)。
優(yōu)勢
環(huán)境控制精確、穩(wěn)定:溫度、濕度、CO? / O? 控制能力較強,適合對環(huán)境敏感的實驗體系。
快速恢復(fù)能力:開門擾動后能迅速恢復(fù)至設(shè)定條件,減少對樣本的干擾。
多門 / 分隔設(shè)計:可局部開門,減少整體污染與擾動。
滅菌能力:濕熱滅菌機制便于內(nèi)部定期消毒,減少污染積累。
日志與追蹤:趨勢記錄、報警記錄、操作記錄便于質(zhì)量控制與追溯。
氣體切換與備用設(shè)計:支持備用氣源自動切換,保障連續(xù)運行。
適合動態(tài)環(huán)境模擬:可編程控制溫度 / 氧濃度等,適用于設(shè)計復(fù)雜刺激方案。
局限性 / 注意點
開門擾動仍不可避免:盡管恢復(fù)快,但短時擾動不可完全避免,必須在程序中加以控制。
傳感器漂移 / 標定誤差:長期使用中 CO? / O? /溫度傳感器可能出現(xiàn)漂移,需定期校準。
材料耐熱 / 濕熱影響:某些連接管、塑料件或傳感器可能不耐受滅菌循環(huán)溫濕度,需確認兼容性。
氣體純度依賴:輸入 CO? / O? / N? 氣體需保證純度,無油水、無雜質(zhì),避免污染或傳感器污染。
樣本布局限制:過密的樣本排列可能阻礙氣體 / 濕度 /溫度均勻性傳播,需合理布局。
設(shè)備成本 / 能耗:高性能控制、加熱、滅菌功能帶來較高能耗與維護成本。
復(fù)雜程序控制限制:若設(shè)計極其復(fù)雜、非線性的環(huán)境變化,可能受控件編程能力或切換延遲限制。
安裝環(huán)境要求:設(shè)備應(yīng)放置于溫度環(huán)境穩(wěn)定、通風(fēng)良好、避免強熱源或冷源干擾的位置。
六、對“模擬實驗環(huán)境”這一角色的總結(jié)
賽默飛 Heracell 240i 是一款高性能、高可靠度的 CO? / 三氣體培養(yǎng)箱,從結(jié)構(gòu)設(shè)計、控制系統(tǒng)、氣體 / 濕度 / 溫度模塊到滅菌系統(tǒng),都具備用于“模擬實驗環(huán)境”的基礎(chǔ)能力。特別是在那些對環(huán)境穩(wěn)定性、恢復(fù)速度、動態(tài)控制、污染風(fēng)險等有較高要求的研究中,這款設(shè)備可以發(fā)揮較為顯著的作用。
從用戶視角考慮,當(dāng)你要撰寫一段關(guān)于“使用 Heracell 240i 模擬實驗環(huán)境”的介紹時,可以圍繞以下幾個主線展開:
結(jié)構(gòu)設(shè)計與關(guān)鍵部件:介紹腔體材質(zhì)、溫控系統(tǒng)、水箱濕控系統(tǒng)、氣體控制模塊、控制界面、滅菌體系等。
環(huán)境控制能力:詳細說明其溫度、濕度、CO? / O? 控制精度、恢復(fù)速度、動態(tài)可編程能力等。
應(yīng)用示例:舉例說明在細胞培養(yǎng)、低氧研究、溫度應(yīng)激實驗、聯(lián)合刺激模型等中的模擬方案。
優(yōu)勢對比:強調(diào)與傳統(tǒng)培養(yǎng)箱或低端箱體相比,在恢復(fù)速度、控制精度、污染控制、編程靈活性上的優(yōu)勢。
注意事項與局限:指出使用中必須重點關(guān)注的傳感器校準、開門擾動、樣本布局、材料兼容性、氣體純度等問題。